[发明专利]一种连翘酯苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种连翘酯苷的制备方法，尤其是一种从植物中提取连翘酯苷的制备方法。

背景技术

连翘酯苷(Forsythoside A，Forsythiaside)，分子式：C₂₉H₃₆O₁₅，分子量：624.594，CAS登录号：79916-77-1。主要存在于木犀科、玄参科多种植物中，其中木犀科植物连翘Forsythia suspensa  (Thunb.)Vahl的果实中含量较高，且原料来源丰富。其分子式如下：

现代研究表明，连翘酯苷具有免疫调节、抑菌等多种活性，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

木犀科植物连翘Forsythia suspensa  (Thunb.)Vahl的果实被作为中药连翘应用，具有具有清热解毒、消肿散结的功效。

现有技术中，尚没有适用于高纯度连翘酯苷工业化大生产的制备工艺报道，如吴昭晖等人披露(吴昭晖，等.高效液相色谱法制备连翘酯苷对照品.第一军医大学学报，2005，25(11)：1398)了一种利用高效液相色谱仪制备连翘酯苷的方法，虽然成品纯度高，但该方法对设备要求高且制备量少，并不适合工业化放大运用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的连翘酯苷的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

取连翘果实粗粉，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6％，萃取压力30-50MPa，温度50-70℃，CO₂流量1-3ml/g生药·min，萃取时间80-150min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为5∶2∶1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行4-7级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂并浓缩，加到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60％乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏1836小时，析出淡黄色粉末，分离，即得。

CO₂超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比优选为5％。

CO₂超临界萃取的压力优选为40MPa，温度优选为60℃，CO₂流量优选为2ml/g生药·min。

CO₂超临界萃取的时间优选为100min。

逆流萃取的级数优选为5级。

大孔吸附树脂选自D101型、D102型、AB8型大孔吸附树脂中的一种。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度优选为50％。

大孔吸附树脂洗脱液的收集量优选为5倍量柱体积。

冷藏时间优选为24小时。

制备所得连翘酯苷可采用下列方法检测：

试验例1HPLC法测定连翘酯苷纯度

色谱条件

色谱柱：十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水(25∶75)；流速：1.0mL/min；检测波长：277nm；柱温：30℃。

测定方法

精密称取连翘酯苷2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。

采用本发明制备连翘酯苷，利于大生产操作，能耗小，污染小。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取连翘果实粗粉10Kg，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4％，萃取压力30MPa，温度50℃，CO₂流量1ml/g生药·min，萃取时间80min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为5∶2∶1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行4级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂并浓缩，加到D101型大孔吸附树脂柱上吸附，40％乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏18小时，析出淡黄色粉末，分离，即得连翘酯苷58.4g，经HPLC检测，纯度为94.6％，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2