[发明专利]血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA及其构建与应用

权利要求书

1.一种血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA，其特征在于该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种编码如权利要求1所述的血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA的DNA分子。

3.根据权利要求2所述的一种编码如权利要求1所述的血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA的DNA分子，具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。

4.一种质粒表达载体，其特征在于它含有一种编码如权利要求1所述的血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB 1ScuPA的DNA分子。

5.根据权利要求4所述的种质粒表达载体，该质粒是pET28a-mAnxB1ScuPA，并含有T7启动子。

6.根据权利要求5所述的一种质粒表达载体，该质粒pET28a-mAnxB1ScuPA的构建包括如下步骤：将编码血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA的融合基因用NedI、XhoI双酶切，然后与用NdeI、XhoI双酶切的载体pET28a连接。

7.一种用于权利要求4或5所述质粒表达载体转化的宿主细胞。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于该宿主细胞是大肠杆菌BL21-CP-RIL。

9.一种产生血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA的方法：

A)构建一种融合基因mAnxB1ScuPA(SEQ ID NO：2)，所述融合基因包含编码点突变后的膜联蛋白B1的基因(SEQ ID NO：3)和编码单链尿激酶144-411位氨基酸的基因(SEQ ID NO：4)的融合物，两基因之间以linker(SEQ ID NO：5)连接；

B)构建表达质粒pET28a-mAnxB1ScuPA，该表达质粒是将融合基因mAnxB1ScuPA用NdeI、XhoI双酶切，然后与用NdeI、XhoI双酶切的载体pET28a连接。

C)构建工程菌BL21-CondonPlus-RIL含有pET28a-mAnxB1ScuPA；

D)在IPTG诱导下，工程菌BL21-CP-RIL表达融合蛋白mAnxB1ScuPA。

10.一种如权利要求1所述的血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA在制备预防和治疗血栓性疾病药物中的应用。

11.根据权利要求10所述的血栓靶向溶栓融合蛋白mAnxB1ScuPA在制备预防和治疗血栓性疾病药物中的应用，其特征在于该血栓性疾病是急性心肌梗塞、脑血栓或深静脉血栓。