[发明专利]一种用于诊断或检测白血病的试剂盒无效

专利信息
申请号: 201010294981.7 申请日: 2010-09-28
公开(公告)号: CN101942519A 公开(公告)日: 2011-01-12
发明(设计)人: 司维柯;杨宗林;李招权;潘静;赵宸;李军 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三军医大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;G01N21/64
代理公司: 重庆志合专利事务所 50210 代理人: 胡荣珲
地址: 400038 重*** 国省代码: 重庆;85
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 诊断 检测 白血病 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于诊断或检测白血病的试剂盒,其特征在于,其包含:淋巴细胞分离液、总RNA提取液、逆转录缓冲液、M-MLV逆转录酶、逆转录引物Oligo(dT)18、RNA酶抑制剂、DEPC水、定量PCR缓冲液、Taq DNA聚合酶、dNTPs溶液、Wnt5a基因标准品、内对照GAPDH基因标准品、检测Wnt5a基因的引物和荧光探针、检测内对照GAPDH基因的引物和荧光探针。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含的各组分的浓度为:5×逆转录缓冲液、200U/μL M-MLV逆转录酶、500ng/μL逆转录引物Oligo(dT)18、40U/μL RNA酶抑制剂、DEPC水、10×定量PCR缓冲液、10U/μLTaq DNA聚合酶、10mM dNTPs溶液、108拷贝/μL Wnt5a基因标准品、108拷贝/μL内对照GAPDH基因标准品。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述Wnt5a基因标准品为含有Wnt5a部分编码序列的重组pMD-19质粒,该Wnt5a部分编码序列如SEQ ID NO:1所示。

4.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述GAPDH基因标准品为含有GAPDH部分编码序列的重组pMD-19质粒,该GAPDH部分编码序列如SEQ ID NO:2所示。

5.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述检测Wnt5a基因的引物如SEQ ID NO:3-4所示、荧光探针如SEQ ID NO:5所示。

6.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述检测GAPDH基因的引物如SEQ ID NO:6-7所示、荧光探针如SEQ ID NO:8所示。

7.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,还包含阳性对照和阴性对照。

8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照为正常人骨髓细胞总RNA逆转录合成的cDNA。

9.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述阴性对照为灭菌双蒸水。

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