[发明专利]3-Fmoc胺基-3-（3-硝基-4-氟苯基）丙酸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及有机合成领域，特别是，涉及一种3-Fmoc胺基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸及其制备方法。 

背景技术

非天然氨基酸是非蛋白基因编码的氨基酸，在基因组学、蛋白质组学等前沿生物技术研究中有重要的应用。例如，α-非天然氨基酸在蛋白质、核苷和核酸的研究中得到了广泛应用：它们能限制多肽构象的灵活性、提供具有稳定二级结构的脱氧核糖核酸或核糖核酸分子、增强多肽对酶的稳定性以及提高药代动力学和生物活性；β-非天然氨基酸是β-内酰胺的前体和很多潜在酶抑制剂的关键成分，具有相当有趣的药理活性。β-非天然氨基酸在组合化合物库的构建和药物研究中已经成为越来越重要的合成模块。此外，将非天然氨基酸掺入蛋白序列是合成生物学设计新蛋白的一个策略。这种策略对研究天然蛋白质的折叠和功能有重要作用。现在已有大约超过30种非天然氨基酸被人工插入到生物体合成的天然蛋白质中。 

同时，非天然氨基酸在以重组蛋白质为主的基因工程药物，如重组细胞因子、蛋白质激素、重组血浆蛋白、重组溶血栓药物、可溶性受体、治疗性抗体、重组药用动植物蛋白等以及预防或治疗用疫苗、核酸药物、小分子多肽药物等生物药物和疫苗方面有重要的应用。非天然氨基酸自身可以是重要的药物，它们也是很多市售药物的重要结构单元。目前，世界上最著名的医药公司，都在研究含有非天然氨基酸骨架的多肽类药物，这些药物多用于抗菌、消炎、抗惊厥、抑制细胞生长和抗肿瘤等方面。很多药物已经进入临床研究阶段。对于制药公司而言，在新药的研发过程中，已经没有人敢忽视非天然氨基酸的 作用。 

发明内容

本发明的目的是提供3-Fmoc胺基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸及其制备方法。 

本发明提供下述式(I)化合物： 

本发明的式(I)化合物3-Fmoc胺基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸的合成路线如下式所示： 

其中，1)为浓硫酸，浓硝酸；2)为丙二酸，乙酸铵；3)为FmocCl或Fmoc-Osu，碳酸钠。 

本发明进一步提供制备上述化合物的方法，包括下述步骤：1)使4-氟苯甲醛在浓硫酸和浓硝酸作用下反应生成3-硝基-4-氟苯甲醛；2)将3-硝基-4-氟苯甲醛、丙二酸和乙酸铵在醇类溶剂中回流6-8小时得到3-氨基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸；3)将3-氨基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸、质量百分比浓度为8-12％的碳酸钠溶液和二氧六环混合，形成悬浮液后向其中加入FmocCl或Fmoc-Osu和二氧六环的溶液，反应生成3-Fmoc胺基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸。 

其中，步骤1)中所加浓硫酸的量为2-4毫升/克4-氟苯甲醛，所加浓硝酸的量为0.4-0.6毫升/克4-氟苯甲醛。 

步骤2)中所述3-硝基-4-氟苯甲醛、丙二酸和乙酸铵的摩尔比为1∶1∶2。 

步骤2)中所述醇类溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇。 

步骤3)中，将c摩尔3-氨基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸、(2-2.5)c升8-12％的碳酸钠溶液和(1.0-1.2)c升的二氧六环混合，剧烈搅拌形成悬浮液；将此悬浮液冷却至0-5℃，缓慢滴加(1.05-1.10)c摩尔FmocCl或Fmoc-Osu和(1.5-2.0)c升二氧六环的溶液；滴加完毕后，反应体系在0-5℃下搅拌1-2小时后逐渐升至室温，室温下搅拌12-24小时。 

本发明还提供包含式(I)化合物的药剂。 

本发明还提供式(I)化合物在用于制备治疗或预防糖尿病、糖尿病并发症、急性早幼粒细胞白血病(APL)、炎性疾病、器官移植排斥、原虫感染、自身免疫性疾病或肿瘤的药物中的应用。 

具体而言，本发明提供制备3-Fmoc胺基-3-(3-硝基-4-氟苯基)丙酸的方法，包括下述步骤： 

将a摩尔4-氟苯甲醛(化合物4)于-5℃至0℃下缓慢滴加至浓硫酸(2-4毫升/克4-氟苯甲醛)和浓硝酸(0.4-0.6毫升/克4-氟苯甲醛)的混合溶液中。滴加速度为2-4滴4-氟苯甲醛/秒。滴加完毕后，将反应体系逐渐升至室温。室温反应1-3小时后，将反应体系倒入冰块中(20-25克冰/克4-氟苯甲醛)，生成大量固体。待冰块完全融化成水后，抽滤反应体系得到固体产物。水相用低极性有机溶剂萃取2-4次，抽滤得到的固体产物用同样的低极性有机溶剂溶解。合并所有的有机相，先用饱和碳酸氢钠溶液洗涤至pH值为7-8，再用饱和食盐水洗涤，然后用干燥剂干燥。过滤后，浓缩除去有机溶剂，得到b摩尔3-硝基-4-氟苯甲醛(化合物3)。