[发明专利]一种制备天然18-α甘草酸的方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种用于肝病治疗的天然18-α甘草酸的制备方法，属于医药领域范畴。

背景技术

甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza in flataBat.、或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的根和根茎，主产于内蒙古、新疆、甘肃等地。甘草入药已有悠久历史，《神农本草经》就将其列为药之上乘，古代医学家尊称其为“国老”。由于其资源珍贵，被国家列入国家二级保护野生药材。甘草化学成分种类较多，主要含三萜皂苷类、黄酮类、生物碱、多糖等成分。以甘草入药开发的制剂很多，临床上得到了较广泛的应用，主要用于肝病、呼吸道疾病、胃病等方面的治疗。

甘草酸(C₄₂H₆₂O₁₆)属于甘草中三萜皂苷类成分，也是甘草中起保肝、抗炎作用的主要成分。以甘草酸为中间体开发出的药用原料及制剂很多，临床主要用于肝炎的治疗，如甘草酸单铵盐、甘草酸二钾盐、异甘草酸镁等。由于甘草酸分子结构的18位碳原子是一个手性碳，因此甘草酸具有一对同分异构体，即18-α甘草酸和18-β甘草酸。构象研究表明，由于空间位阻效应，18-α甘草酸在溶解性、旋光度等理化性质以及药理活性等许多方面与18-β甘草酸都具有很大的差别。在临床使用上，以两种甘草酸异构体分为主要成分的制剂都具有广泛应用，如复方甘草酸苷片是以18-β甘草酸单铵盐为主要活性成分，而异甘草酸镁注射液是以18-α甘草酸单镁盐为主要成分。因此，通过深入研究，明确18-α甘草酸和18-β甘草酸不同作用特点，具有很好的现实意义。

根据文献报道，在天然甘草药材中，甘草酸以18-α甘草酸和18-β甘草酸两种构型同时存在，在《RP-HPLC法测定甘草中甘草酸差向异构体的含量》(沈阳药科大学学报，2008，11期)介绍了测定甘草酸中两种异构体含量的方法。本专利发明人通过研究也证明，天然甘草中同时存在两种构型的甘草酸，其中18-α甘草酸的含量较低。由于二者结构相似，分离难度大，而且在不同产地、不同来源的甘草中含量差异较大，因此，很难从天然甘草中制备18-α甘草酸。目前市场上应用较广泛的异甘草酸镁是18-α甘草酸镁盐，其制备方法是通过将甘草酸铵盐在强碱溶液中经过异构化反应制备得到的，属于非天然产物范畴，与本发明所述的制备方法有本质的差异。在其他公开和发表文献或专利中，尚未见从甘草药材中分离制备天然18-α甘草酸的报道。

发明内容

本发明的目的是从资源综合开发利用的角度出发，提供了一种从天然甘草药材中分离制备得到的天然18-α甘草酸。

本发明还提供了一种从天然甘草药材中分离制备得到天然18-α甘草酸的制备方法。

本发明的另一目的在于提供一种含有一定比例的18-α甘草酸药物组合物的制备方法，临床用于肝病的治疗。

本发明的优势在于制备天然18-α甘草酸采用的是现代中药分离纯化技术，提高了中药材资源的利用率。

本发明的优势还在于在采用分离纯化技术制备天然18-α甘草酸的过程中，由于没有进行化学反应，减少了带入反应副产物和杂质的风险，进一步提高了产品的安全性。

根据本发明的比较优选的实施方案，从甘草中分离纯化天然18-α甘草酸的制备方法包括如下步骤：

(1)取甘草药材，粉碎成粗粉，加入适量一定浓度的氨水浸泡提取一定时间，将其中的甘草酸类成分充分转化成甘草酸铵盐，过滤，药渣再加一定浓度的氨水浸泡提取数次，合并提取液，减压浓缩至一定体积，静置，放置至室温，过滤，得浓缩液。

(2)取浓缩液，在搅拌状态下向浓缩液中缓缓加入一定浓度的酸溶液适量，调节溶液至一定的PH值，放冷，进行酸沉，使18-β甘草酸充分沉淀，离心过滤，分别得到以18-β甘草酸为主要成分的固体物和以18-α甘草酸为主要成分的滤液。

(3)取滤液，过一定型号的大孔吸附树脂柱，薄层监测，上柱完成后，加水充分洗脱去除无机盐及其他大极性杂质后，改用一定浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至稠膏。

(4)取稠膏，加入含有一定比例有机溶剂的水溶液适量，溶解，低温静置结晶，过滤，即得天然18-α甘草酸粗品。

(5)取18-α甘草酸粗品，加入含有一定比例有机溶剂的水溶液适量，溶解，低温静置结晶，过滤，即得天然18-α甘草酸纯品。