[发明专利]特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用有效
申请号: | 201010255722.3 | 申请日: | 2010-08-17 |
公开(公告)号: | CN101948859A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 刘建军;蒋英芝;杨细飞;李杰;周丽 | 申请(专利权)人: | 深圳市疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/867;C12N15/113;C12N15/66;A61K48/00;A61P1/16;A61P35/00;A61P43/00 |
代理公司: | 深圳市科吉华烽知识产权事务所 44248 | 代理人: | 胡吉科 |
地址: | 518020 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特异性 抑制 set 蛋白 表达 shrna 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SETshRNA的寡核苷酸链模板序列,所述的可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列正向插入表达载体的多克隆位点序列内;所述可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列依据SET mRNA靶序列设计。
2.如权利要求1所述的特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:所述表达载体为慢病毒表达载体pLVX-shRNA1,所述的多克隆位点包BamH I和EcoR I限制性酶切位点,所述寡核苷酸链包括Sense+Loop+Antisense+终止序列,并在两端加上BamH I和EcoR I酶切位点;所述的Loop为TTCAAGAGA,所述的终止序列为TTITTT。
3.如权利要求2所述的特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:所述的SET mRNA靶序列为5′-GGATGAAGGTGAAGAAGAT-3′(SQEID No 1);所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列,所述正义链序列为:
5′-GATCCGGATGAAGGTGAAGAAGATTTCAAGAGAATCTTCTTCACCTTCATCCTTTTTTG-3′(SQE ID No 6);
所述反义链序列为:
5′-AATTCAAAAAAGGATGAAGGTGAAGAAGATTCTCTTGAAATCTTCTTCACCTTCATCCG-3′(SQE ID No 7)。
4.如权利要求2所述的特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:所述的SET mRNA靶序列为5′-GTGAAATAGACAGACTTAAT-3′(SQE ID No 2);所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列,所述正义链序列为:
5′-GATCCGTGAAATAGACAGACTTAATTTCAAGAGATTAAGTCTGTCTATTTCATTTTTTG-3′(SQE ID No 8);
所述反义链序列为:
5′-AATTCAAAAAATGAAATAGACAGACTTAATTCTCTTGAAATTAAGTCTGTCTATTTCACG-3′(SQE ID No 9)。
5.如权利要求2所述的特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:所述的SET mRNA靶序列为5′-GCAGCAAGAAGCGATTGAAC-3′(SQEID No 3);所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列,所述正义链序列为:
5′-GATCCGCAGCAAGAAGCGATTGAACTTCAAGAGAGTTCAATCGCTTCTTGCTGTTTTTTG-3′(SQE ID No 10);
所述反义链序列为:
5′-AATTCAAAAAACAGCAAGAAGCGATTGAACTCTCTTGAAGTTCAATCGCTTCTTGCTGCG-3′(SQE ID No 11)。
6.如权利要求2所述的特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体,其特征是:所述的SET mRNA靶序列为5′-GATGAAGAGGCACTGCATT-3′(SQE IDNo 4);所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列,所述正义链序列为:
5′-GATCCGATGAAGAGGCACTGCATTTTCAAGAGAAATGCAGTGCCTCTTCATCTTTTTTG-3′(SQE ID No 12);
所述反义链序列为:
5′-AATTCAAAAAAGATGAAGAGGCACTGCATTTCTCTTGAAAATGCAGTGCCTCTTCATCG-3′(SQE ID No 13)。
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