[发明专利]呋喃二萜类新化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域：

本发明涉及植物化学新化合物的分离提取及其在临床中的应用，具体来讲，涉及从三白草科药用植物中分离新化合物呋喃二萜及其制备方法和在防治心脑血管疾病中的应用。

背景技术：

血管内皮细胞产生和表达各种调节分子，从而在生理和病理状态下对血管功能的调节起关键作用。血管内皮细胞损伤不仅是动脉粥样硬化的始动因素，而且对冠心病、高血压等疾病的发生和发展起着重要的作用。因此，研究对血管内皮细胞损伤的保护，是防治心脑血管疾病的一种新途径。

过氧化氢作为活性氧家族中的一员，可直接作用于膜脂质，形成脂质过氧化物，从而使MDA(丙二醛)生成增加，质膜通透性增加，外钙内流增多，LDH(乳酸脱氢酶)漏出也增多，同时SOD(超氧化物歧化酶)活性下降；过氧化氢可直接损伤内质网，并可加剧线粒体功能障碍，使氧化磷酸化紊乱，导致内皮细胞损伤甚至激活凋亡调控基因，促发凋亡。

通过H₂O₂造成血管内皮细胞损伤，采用MTT法测定细胞线粒体活性，根据光密度值的变化，可以观察样品对H₂O₂所致血管内皮细胞损伤的保护作用，从而筛选出具有防治心脑血管疾病的药物。

三白草Saururus chinensis(Lour.)Baill为三白草科Saururaceae三白草属Saururus植物，别名塘边藕，产于河北、山东、河南和长江流域及其以南各省区。据《中华人民共和国药典》2010版一部记载，三白草有利尿消肿，清热解毒的功效，用于水肿，小便不利，淋沥涩痛，带下；外治疮疡肿毒，湿疹。Ryu S Y等研究发现，三白草的乙醇提取液对大鼠动脉具血管扩张作用，EC₅₀值为9.1μg/ml(Ryu S Y，Oh K S，Kim Y S，et al.Antihypertensive，vasorelaxant and inotropic effects of an ethanolic extract of the roots of Saururus chinensis[J].Journal of Ethnopharmacology，2008，118(2)：284-289.)。在离体大鼠心脏可减轻左心房压以及心律，长期口服给药可降低高血压大鼠的血压(约20mmHg)。其降压作用源自直接的血管舒张及减弱心脏收缩力。Oh K S等从三白草中分得的木脂素三白草醇(saucerneol)、三白草醇D(saucerneol D)、三白草醇E(saucerneol E)、马纳萨亭A及B、三白草酮(sauchinone)三白脂素(saururenin)及红楠素D(machilin D)(Oh K S，Yeon H C，Shi Y R，et al.Cardiovascular effects of lignans isolated from Saururus chinensis[J].Planta Med，2008，74(3)：233-238.)，这些化合物对大鼠离体主动脉环产生浓度相关的松弛作用，其中三白草醇、三白草醇D及红楠素D的作用尤为明显。进一步研究结果表明：上述八个化合物都具有心血管松弛活性和负性肌力的作用。

本实验室在深入研究三白草化学成分的过程中，分离纯化得到并鉴定了两个全新结构化合物呋喃二萜(1)、呋喃二萜(2)，体外活性实验表明，它们对H₂O₂所致血管内皮细胞损伤具有保护作用，呈现了防治心脑血管疾病的功效。本发明所涉及的源自三白草新化合物呋喃二萜及其在防治心脑血管疾病中的应用，迄今为止，尚未见有任何相关的报道。

发明内容：

本发明提供一种以药用植物三白草Saururus chinensis(Lour.)Baill的全草为原料，提取分离具有治疗和/或预防心血管疾病的呋喃二萜类化合物，其结构如下所示：

本发明还提供了所述呋喃二萜化合物(1)和呋喃二萜化合物(2)的制备方法，其技术方案包括如下步骤：

以药用植物三白草Saururus chinensis(Lour.)Baill的全草为原料，经95％乙醇回流提取，用蒸馏水混悬提取物，依次用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，之后，将乙酸乙酯萃取部分用硅胶柱层析、MCI HP20树脂柱层析、硅胶柱层析和反相C-18半制备HPLC分离手段得到化合物(1)和(2)，详细流程见图1。

结构鉴定：