[发明专利]纳米吸附改善酶稳定性的方法无效
申请号: | 201010245800.1 | 申请日: | 2010-08-05 |
公开(公告)号: | CN102344918A | 公开(公告)日: | 2012-02-08 |
发明(设计)人: | 徐红华;李丽;于国萍;姜毓君 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14 |
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地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纳米 吸附 改善 稳定性 方法 | ||
1.本发明涉及一种通过纳米颗粒作为吸附载体改善酶稳定性的方法,其特征在于选择不同粒径纳米颗粒为载体,将酶通过物理吸附作用固定在该载体上。
2.权利要求1中所提到的酶主要有两种:胰蛋白酶(最适温度37℃,最适pH7.8,等电点10.9,最适条件下的酶活力为285U/mg)和木瓜蛋白酶(最适温度50℃,最适pH6.0,等电点8.75,最适条件下的酶活力为617U/mg)
3.权利要求1中所提到的纳米颗粒是二氧化硅颗粒,粒径有20nm、100nm和300nm三种。
4.权利要求1所提到改善酶稳定性的方法,具体步骤如下:用不同pH的缓冲液配制一定浓度的酶溶液和纳米SiO2溶液。取酶溶液和纳米SiO2溶液按一定比例混合,于室温下在电动搅拌器作用下搅拌吸附一定时间。
5.根据权利要求4中所述的方法,其特征在于:对于胰蛋白酶,配制酶和载体缓冲溶液的pH范围在4.0-10.0;对于木瓜蛋白酶,配制酶和载体缓冲溶液的pH范围在4.0-8.0。
6.根据权利要求4中所述的方法,其特征在于纳米SiO2溶液的浓度10mg/mL;酶溶液的浓度为3.3mg/mL,10mg/mL和30mg/mL,使酶和载体的质量比实现1∶3,1∶1和3∶1三个比例。
7.权利根据权利要求4中所述的方法,其特征在于纳米SiO2和酶的吸附时间是3h。
8.根据权利要求5中所述的方法,其特征在于pH在4.0-8.0的缓冲液是0.1mol/L的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液;pH范围在8.1-8.9的缓冲液是0.05mol/L的Tris-盐酸缓冲液;pH范围在9.0-10.0的缓冲液是0.05mol/L的硼砂-氢氧化钠缓冲液。
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