[发明专利]锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法有效
| 申请号: | 201010228740.2 | 申请日: | 2010-07-15 |
| 公开(公告)号: | CN101869077A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
| 发明(设计)人: | 吴龙华;贲爱玲;谭维娜;王松凤;骆永明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南京土壤研究所 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 唐建清 |
| 地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 锌镉超 积累 植物 景天 组织培养 育苗 方法 | ||
1.锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征是采用茎尖组织诱导分化法:将伴矿景天消毒后取带有腋芽的0.3~0.5cm茎段或茎尖,接种到诱导培养基上,每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养20~40天后,取出长有簇生芽的茎尖,选取大芽,转接到壮苗培养基上,每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养3~8周,得到含有许多2~3cm长幼根的组培苗,然后将培养瓶移到室外,打开瓶口,浇灌蒸馏水放置2~3天后,用水洗去培养基,移栽至pH 6.0~8.0的全营养素有机质基质中,2~4周得到组培苗。
2.根据权利要求1所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的诱导培养基是含有(0.05~0.15)mg/L 6-BA和(1.5~2.5)mg/LNAA的MS培养基。
3.根据权利要求1所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的壮苗培养基是1/2MS培养基,其中含有浓度为(0.1~0.5)mg/L6-BA、(1.5~2.0)mg/L NAA、5μmol/L Cd(NO3)2和(0.1~1.5)mg/L IBA。
4.锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征是采用茎段愈伤组织诱导法:将伴矿景天茎消毒,切去叶和侧芽与顶芽,切成0.3~0.5cm的小段,接种到诱导培养基上,无光照的培养箱中3~6周诱导愈伤组织,然后将愈伤组织转移至分化培养基中,每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养40~50天,得到3~5cm高并带有1cm以上幼根的组培苗,然后将培养瓶移到室外,打开瓶口,浇灌蒸馏水放置2~3天后,用水洗去培养基,移栽至pH 6.0~8.0的全营养素有机质基质,2~4周得到组培苗。
5.根据权利要求4所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的诱导培养基是MS培养基,其中含有浓度为(0.1~0.5)mg/L 6-BA和(1.5~2.0)mg/L 2,4-D。
6.根据权利要求4所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的分化培养基是MS培养基,其中含有浓度为(0.1~0.5)mg/L 6-BA和(0.1~0.5)mg/L 2,4-D。
7.锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征是采用叶片愈伤组织诱导法:将伴矿景天叶片消毒,切去叶缘、叶脉和叶柄,切成0.2~0.3cm2的小片,接种到诱导培养基上,无光照的培养箱中4~8周诱导愈伤组织,然后将愈伤组织转移至分化培养基中,每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养50~70天,得到3~5cm高并带有1cm以上幼根的组培苗,然后将培养瓶移到室外,打开瓶口,浇灌蒸馏水放置2~3天后,用水洗去培养基,移栽至pH 6.0~8.0的全营养素有机质基质,2~4周得到组培苗。
8.根据权利要求7所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的诱导培养基是MS培养基,其中含有浓度为(2.5~3.5)mg/L NAA和(0.5~1.0)mg/L TDZ。
9.根据权利要求7所述的锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法,其特征在于所说的分化培养基是MS培养基,其中含有浓度为(0.1~0.5)mg/L 6-BA和(0.1~0.5)mg/L 2,4-D。
10.上述任一权利要求中的培养基均为已灭菌的培养基,在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.5~5.8;在离体培养过程中培养温度为25±1℃。
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