[发明专利]乙肝核心蛋白与结核抗原或抗原片段的重组融合蛋白及用途

权利要求书

1.一种重组融合蛋白，其特征在于该重组融合蛋白至少包含乙肝核心蛋白和结核抗原或抗原片段两个部分，其中所述乙肝核心蛋白的特征在于：对应于如SEQ ID NO：1所示序列或该序列N端144个氨基酸。

2.根据权利要求1所述的结核抗原或抗原片段，其特征在于至少为下列一种结核抗原或抗原片段序列：

ESAT-6、TB10.4、Ag85A、Ag85B、PPE18、MTB32C；

3.根据权利要求1所述的重组融合蛋白还可以包含至少下列一种免疫辅助因子序列：

IL-2、IL-10、IL-12、GM-CSF、IFN-γ、IL-4和/或IL-6；

4.编码根据权利要求1，2，3所述的由乙肝核心蛋白、结核抗原或抗原片段、免疫辅助因子所构成的重组融合蛋白的核酸和氨基酸序列。

5.制备编码权利要求1，2，3所述重组融合蛋白基因序列的方法，是利用化学合成和重叠延伸PCR的方法得到乙肝核心蛋白片段所对应的基因序列，再通过重叠延伸PCR，或者通过引入常用的酶切位点的方法将结核抗原或抗原片段和免疫辅助因子以一定的插入方式，分别插入到上述乙肝核心蛋白的相同或不同的许可位点。

6.根据权利5所述的插入方式，其特征在于：

结核抗原或抗原片段的插入方法为单抗原或抗原片段插入，单抗原或抗原片段重复插入，单抗原或抗原片段经连接序列间隔后重复插入，不同抗原或抗原片段串联插入，不同抗原或抗原片段串联重复插入，不同抗原或抗原片段经连接序列间隔后串联插入，不同抗原或抗原片段经连接序列间隔后串联重复插入。

免疫辅助因子的插入方式为：一种免疫辅助因子单独插入，单种免疫辅助因子经连接序列间隔后重复插入，不同免疫辅助因子经连接序列间隔后串联插入，不同免疫辅助因子经连接序列间隔后串联重复插入。

7.根据权利5所述的结核抗原或抗原片段在乙肝核心蛋白中的许可位点，其特征在于是以下任何位点之一：

(1)78-79位氨基酸之间；

(2)替换76-81位氨基酸之间的任意n个氨基酸(1≤n≤6)；

(3)羧基端最后一位氨基酸之后。

8.根据权利要求5所述的免疫辅助因子在乙肝核心蛋白中的许可位点，其特征在于是以下任何位点之一：

(1)78-79位氨基酸之间；

(2)替换76-81位氨基酸之间的任意n个氨基酸(1≤n≤6)；

(3)羧基端最后一位氨基酸之后；

附加条件是免疫辅助因子必须在结核抗原或抗原片段存在的前提下出现，两者之间有/无连接序列。

9.一种以本发明重组融合蛋白作为有效成分的疫苗或药物，其特征在于：所述疫苗或药物中有/无医学上可以接受的药用辅料。

10.根据权利9所述的疫苗或药物，在预防和/或治疗结核病中的应用。