[发明专利]药品、保健食品中掺杂氨基比林的快速测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种氨基比林成分的检测方法，具体是检测药品和保健食品中，尤其是用于检测抗风湿类中药制剂和保健食品中是否添加氨基比林成分的方法。

背景技术

氨基比林(Aminophenazone)，又名匹拉米洞、二甲氨基安替比林，其化学名称为4-二甲氨基-1，5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮，分子式为C₁₃H₁₇N₃O。

氨基比林解热镇痛作用较强，缓慢而持久，消炎抗风湿作用与阿司匹林相似。通过抑制下视丘前列腺素的合成和释放，恢复体温调节中枢感受神经元的反应性而起退热作用；通过抑制环氧化酶，选择性抑制下丘脑体温调节中枢前列腺素的合成，导致外周血管扩张、出汗而达到解热的作用；通过抑制前列腺素等的合成和释放，提高痛阈而起到镇痛作用，属于外周性镇痛药。氨基比林因能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质，故单用制剂已淘汰，临床常用的是其复方制剂。

目前临床常用的含氨基比林的复方制剂多为处方药，患者需要在医生的指导下方能服用，国家相关部门对此类药品的生产、经营及使用进行了严格的规定，对于氨基比林引起的药物不良反应如恶心、呕吐、过敏性皮炎等也曾有过报道。但近年来，一些抗风湿类中成药和保健食品中非法添加氨基比林的情况却日趋严重，各相关机构也为此加大了监察力度，打击非法添加氨基比林样品。非法添加氨基比林的中药制剂和保健食品主要在广大的农村和经济欠发达的中小城市销售，由于这些地区技术监管能力薄弱，缺少必要的检验仪器和技术，导致非法添加药品的滥用，给人民群众的用药安全带来隐患。

目前检验药品和保健食品中非法添加氨基比林的方法主要有如下三种：

1、薄层色谱法：

样品中的待测成分用三氯甲烷提取，所得的供试品溶液和对照品溶液点在同一块薄层板上(薄层板通常由硅胶制成)，用展开剂展开，晾干后，薄层板在紫外灯下检示。不同物质在薄层色谱板不同的位置上以斑点的形式出现(原因是不同的物质有不同的迁移速度，常以色谱迁移值表示展开后斑点到原点之间的距离)，根据待测样品是否在与对照品相应位置上出现斑点这一实验所得现象来判断待测样品中是否含有目标成分。氨基比林对照品溶液和样品提取所得的供试品溶液在同一块薄层色谱板上点样，展开剂展开，晾干后，薄层色谱板在紫外灯下检示，如果供试品溶液薄层色谱图在与氨基比林对照品相应的位置上出现斑点，则提示样品中可能含有氨基比林。

方法：取氨基比林适量，以三氯甲烷溶解配制成10mg/ml的溶液，吸取10μl，点于硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水(9∶6∶1∶0.01)为展开剂，展距为15.5cm。展开后，晾干，置紫外灯下(254nm)检视，Rf＝0.57。

薄层色谱法的优点是不需要使用昂贵的分析仪器。该方法缺点是：(1)色谱分辨率较低，中药制剂成分复杂，干扰因素较多，易将某些成分误判为氨基比林，某些共存成分如果量较大且色谱迁移值与氨基比林接近则会干扰目标成分的检出。(2)色谱展开和晾干的时间长，不能满足快速测定的要求。(3)薄层色谱板需要干燥存放，环境的温度和湿度对分离效果的影响大。(4)要求实验人员有较好的经验。(5)需要有固定的场所，不适合做流动性大的现场检测。

2、高效液相色谱法

高效液相色谱是现代常用的分析方法。在相同的色谱条件下，不同的物质有不同的色谱保留时间。在相同的色谱条件下氨基比林对照品溶液和样品提取所得的供试品溶液分别进样，根据色谱保留时间可判断待测样品中是否含有氨基比林。

色谱条件：色谱柱：C₁₈(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：甲醇-1％醋酸溶液(以二乙胺调节pH至3.7)34∶66

流速：1.0ml/min   

检测波长：260nm

柱温：30℃

进样体积：20μl

理论塔板数：11458

保留时间：13.35min

高效液相色谱法的优点是色谱分离效率高，灵敏度高。缺点是：(1)仪器价格昂贵，样品前处理时间长，色谱柱易受污染，分析成本高。(2)当共存成分的色谱保留时间与氨基比林的色谱保留时间接近时容易作出错误的判断。(3)仪器对使用环境要求高，需要固定摆放，不适合做流动性大的现场检测。

3、高效液相色谱-质谱联用法