[发明专利]一种甲型H1N1流感病毒及其用途有效
| 申请号: | 201010216388.0 | 申请日: | 2010-06-30 | 
| 公开(公告)号: | CN101974489A | 公开(公告)日: | 2011-02-16 | 
| 发明(设计)人: | 居丽雯;姜庆五;蒋露芳;吕锡宏 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 | 
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;G01N33/569;A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93 | 
| 代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 吴桂琴;包兆宜 | 
| 地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 h1n1 流感病毒 及其 用途 | ||
1.一种甲型H1N1流感病毒,其特征在于,该病毒含有HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段,8个片段的核苷酸序列依次分别如SEQ ID NO 1-8所示该病毒的保藏号为CCTCC NO:V201015。
2.如权利要求1所述的病毒,其特征在于,该病毒感染MDCK细胞,细胞产生拉网、团聚变圆、脱落现象。
3.权利要求1所述的病毒的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)取流感样患者咽拭标本,经抗生素处理置4℃冰箱,4-5h后接种于MDCK细胞,过夜;
(2)观察细胞病变效应,病变细胞采用甲型流感病毒单克隆荧光抗体检测,荧光显微镜下观察鉴定甲型流感病毒;
(3)提取病毒RNA,RNA反转录为c-DNA;用HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段的引物进行PCR扩增,扩增产物测序。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的抗生素是青霉素和链霉素。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的细胞病变效应是指细胞产生团聚变圆、脱落现象。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,先根据c-DNA扩增产物的碱基数鉴定甲型流感病毒亚型;然后再用8个片段的引物进行PCR扩增。
7.权利要求1所述的病毒的应用,其特征在于,该病毒株应用于制备甲型流感病毒诊断试剂。
8.权利要求1所述的病毒的应用,其特征在于,该病毒株应用于制备甲型流感病毒疫苗。
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