[发明专利]一种高纯度鱼鳞胶原蛋白的制备方法

权利要求书

1.一种鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：以鱼鳞为原料，经酸碱浸泡、粉碎得到鱼鳞浆，采用0.5% NaOH溶液浸泡洗净的鱼鳞2-4h，再采用0.5%醋酸或柠檬酸溶液浸泡鱼鳞6-12h，过滤取鱼鳞部分；采用胶体磨粉碎鱼鳞，得到鱼鳞浆；然后进行酶水解，提取胶原蛋白；采用离子交换层析柱纯化-膜分离的组合技术，对所提取的胶原蛋白进行纯化，得到鱼鳞胶原蛋白；所述的离子交换层析柱的分离介质为阳离子交换树脂，阴离子交换树脂，羟磷灰石材料或大孔网格树脂；纯化过程是将提取出来的胶原蛋白液pH值调整到3.0-8.5，采用动态吸附、动态洗脱工艺，以不同pH值3.0-8.5和不同浓度0.01-5.0%盐溶液为洗脱剂，进行胶原蛋白的分离纯化。

2.根据权利要求1所述的鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：所述鱼鳞胶原蛋白分子量分布为1000-5000Da或100,000-300,000Da，纯度大于95%。

3.根据权利要求1所述的鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：所述的酶水解采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或组织蛋白酶水解鱼鳞浆；采用一步法进行酶水解，或采用二步法进行酶水解。

4.根据权利要求3所述的鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：所述一步法进行酶水解，酶的添加量占鱼鳞浆重量比为0.2-3.0%，调节pH值至1.5～8.0，反应温度为20～55℃，酶解时间6－24小时；所述二步法进行酶解，第一步酶解采用胃蛋白酶，酶的添加量占鱼鳞浆重量比0.1-2.0%，调节pH值至1.5～5.0，反应温度为20～55℃，酶解时间3－12小时；第二步酶解采用高效蛋白酶，酶的添加量占鱼鳞浆重量比为0.01-2.0%，调节pH值至1.5～8.0，反应温度为20～55℃，酶解时间5－12小时。

5.根据权利要求1所述的鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：所述的膜分离是采用截留量为1000Da，5000Da，100,000Da和300,000Da的超滤膜组件，进行胶原蛋白的分子量切割，可分别得到1000-5000Da以及100,000-300,000Da的胶原蛋白产品。