[发明专利]融合表达重组制备人β干扰素

权利要求书

1.一种在大肠杆菌中可溶性融合表达人β干扰素和重组制备方法，其特征在于：融合蛋白标签为硫氧还原蛋白(TRX)，融合表达方式为：TRX-Linker-IFN-β，其中TRX位于N末端，IFN-β位于C末端，中间由连接肽Linker相连。

2.权利1中所述人β干扰素序列(SEQ ID NO：1)，第1位氨基酸前可带有甲硫氨酸(Met)或甘氨酸(Gly)。

3.权利要求1中所述的重组融合蛋白中连接肽(Linker)含有专一性的蛋白酶切位点。

4.权利要求1、3中所述重组融合蛋白中连接肽含有位于蛋白酶酶切位点前的6×His标签。

5.权利要求3、4中所述蛋白酶切位点可以是肠激酶酶切位点DDDDK，或凝血酶酶切位点LVPRGS，或TEV酶酶切位点ENLYFQG，或凝血因子Xa酶切位点IE(D)GR等。

6.权利要求1中所述的重组制备人β干扰素的方法包括：

(1)构建含编码TRX-Linker-IFN-β的cDNA序列的重组质粒；

(2)重组质粒转化大肠杆菌Origami DE3，获得可溶性表达TRX-Linker-IFN-β的融合蛋白的菌株；

(3)表达菌株经发酵培养和诱导表达可用于重组制备的菌体；

(4)含人β干扰素的重组融合蛋白经破菌、融合蛋白的Ni螯和纯化、蛋白酶酶切、反相分离层析、离子交换及Superdex-75凝胶柱层析等步骤，制备重组人β干扰素的过程。

7.权利要求6所述的重组制备的人β干扰素具有更高的抗病毒活性和免疫调节作用，可作为一种治疗病毒性疾病和免疫性病变的药物。