[发明专利]具有降血脂功能的蝇类小分子活性物质的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及蝇类小分子活性物质的研究领域，具体涉及具有降血脂功能的蝇类小分子活性物质的制备方法。

背景技术

家蝇的科学名字为Musca domestica Linnaeus，为昆虫纲，双翅目，家蝇科。早在明朝时期，家蝇幼虫就被用于临床治疗脓疱、疖及消化器官的细菌感染等。近年来在多种创伤的治疗中试用广泛，可用于治疗静脉溃疡(Paul AG，AhmadNW and Lee HL et al.Maggot debridement therapy with Lucilia cuprina：acomparison with conventional debridement in diabetic foot ulcers.2009；6(1)：39-46.)、外伤及手术创伤(Schouten HW，Knippels MC and Franken RJ et al.Maggots in the wound，debridement，disinfection and wound healing 2009；153：A624.)、烧伤(Namias N，Varela JE and Varas RP et al.Biodebridement：a casereport of maggot therapy for limb salvage after fourth-degree burns，J.Burn CareRehabil.2000；21：254-257.)等。研究认为这是蝇蛆具有抑制促炎症反应的作用。近期研究显示，蝇蛆的匀浆液可促进小鼠创伤模型伤口神经的再生。2003年，美国Nietsch KH等就为蝇蛆提取物治疗外伤申请了专利(Nietsch KH，Pooth Rand Methlhorn H et al.Pub No.：US2003/0124199A1.)。近年来国内针对蝇蛆申请的专利主要集中在饲料原料或饲料添加剂、植物生物农药或植物促长剂、药用蛋白质或壳聚糖等。如申请号为02114764.7的中国专利，公开了蝇蛆作为能预防对虾病毒病和促进生长发育的对虾饲料添加剂的应用；申请号为03142623.9的中国专利将人工培养的蝇蛆作为鸡鸭饲料；申请号为200410015664.1的中国专利将蝇蛆、大蒜、百合等作为养鳖饲料的添加剂；申请号为200610018479.7的中国专利申请以蝇蛆作为主要原料，通过加入抗生素等组成一种生物农药用于防治病虫害；申请号为200510026384.5的中国专利公开了一种降血脂功能的昆虫蛋白的制备方法。

当前有关家蝇体内活性物质的研究，多以诱导家蝇幼虫为对象。通过减压蒸馏、离子交换层析和凝胶过滤等步骤从其血淋巴中提取纯化抗菌物质。研究表明：①分离出的抗菌物质多为碱性或近中性蛋白质，且由多种成分组成。②具有广谱的杀灭细菌、真菌、病毒、原虫和抑肿瘤细胞作用。③具有抗炎、抗氧化的作用。目前已对家蝇不同抗菌肽基因采用不同策略和技术路线进行了克隆，夏平安等构建了家蝇基因组文库(夏平安，刘维全，江禹等.家蝇基因组文库的构建.中国兽医学报，2003，23(5)：421-423.)，王来元等构建了家蝇成虫cDNA文库(王来元，王金星，赵小凡等.家蝇cDNA文库的构建.动物医学研究，2001，22(2)：89-92.)，金小宝和朱家勇等构建了家蝇幼虫全长cDNA文库，为家蝇抗菌肽基因研究提供了基因资源库(金小宝，王婷婷，朱家勇.家蝇幼虫脂肪体cDNA文库的构建及其初步鉴定.中国人畜共患病杂志，2005；21(1)：52-55.)。在家蝇抗菌肽基因的克隆表达方面，许琴英和朱家勇等对家蝇抗菌肽基因Defensin进行原核表达及产物的初步活性鉴定(许琴英，朱家勇.家蝇幼虫Defensin成熟蛋白序列的克隆及在原核中的表达.中国热带医学，2005，5(1)：4-6.)。王艳和朱家勇等对家蝇生长发育各阶段抗菌肽基因表达情况进行了研究(Yan Wang，Xiao-bao Jin，Jia-yong Zhu.Expression pattern of antibacterial genes inthe Musca domestic.SCIENCE IN CHINA Series C，2009，52(9)：823-830.)

发明内容

本发明的目的在于根据现有昆虫小分子活性物质的制备过程中存在的活性物质含量低、对昆虫发育的影响较大的缺陷，提供具有降血脂功能的蝇类小分子活性物质的制备方法，该方法制得的小分子活性物质在30KD以下，制备过程中无需将幼虫和饲料分离，通过诱导使活性物质含量提高，安全有效。