[发明专利]一种构树根中黄酮含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物化学技术领域，尤其涉及一种构树根中黄酮含量的测定方法。

背景技术

构树又称皮树、麻叶树或醋桃树，是一种落叶乔木，适应性极强，耐干冷、湿热，根系发达，极少有病虫害，因此在我国分布广泛，栽培面积也不断扩大。

目前构树的主要用途是用来造纸和制造纤维板材料，但据考证，构树的根、叶和果实中均含有可以入药的活性成分，具有抑菌、利尿、补肾、健胃和凉血止血等功效。目前已经有研究报道，从构树叶中提取和分离出这些活性成分并加以利用，如专利200810231595.6从构树叶中提取一种黄酮类物质在制备抗皮肤真菌感染药物的应用，以及专利200810228869.6构树叶黄酮的提取方法，均公开了从构树叶中提取黄酮以及对提取出来的黄酮的应用，但至今未有对构树根中黄酮的提取以及分离的研究报道。因此，测定构树根中的黄酮含量，研究和开发对构树根中的黄酮类物质进行提取分离，是当前进一步提高构树的利用价值，造福人类的关键所在。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种构树根中黄酮含量的测定方法，以利于进一步对构树根中的黄酮进行提取分离。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种构树根中黄酮含量的测定方法，所述方法包括以下步骤：

(1)黄酮的提取：将构树根皮切碎，经烘烤后再用乙醇溶液浸泡，提取上清液并浓缩制得浸膏；

(2)配制待测溶液：将(1)中所得构树根的提取浸膏用乙醇溶液溶解，并依次加入亚硝酸钠溶液、硫酸铝溶液以及氢氧化钠溶液，混合均匀后，配制成待测溶液；

(3)制作黄酮含量对比基准：将芦丁烘至恒重，用乙醇溶液溶解，并依次加入亚硝酸钠溶液、硫酸铝溶液以及氢氧化钠溶液，混合均匀，配制成若干不同浓度梯度的标准溶液，在460nm波长处测定吸光度，根据标准溶液浓度对应的吸光度值制作出黄酮含量对比基准；

(4)黄酮含量的测定：将(2)所得待测溶液在460nm波长处测定吸光度，根据所得吸光度，由黄酮含量对比基准查得该待测溶液的黄酮含量，再根据待测溶液的溶解稀释倍数得出构树根皮中黄酮含量。

优选的，所述黄酮的提取时，将构树根皮切碎，在温度为80℃时烘烤24～30小时，并用75～85wt％的乙醇溶液浸泡。

优选的，所述待测溶液配制时，取杂交构树根的提取浸膏20mg，用60wt％的乙醇溶液溶解稀释到200ml，取0.5ml，先加入5wt％亚硝酸钠溶液0.3ml，放置6min，再加入60wt％的硫酸铝溶液0.3ml，放置6min，然后加入4wt％氢氧化钠溶液4ml，最后用60wt％的乙醇溶液溶解稀释到10ml，放置15min，配制成待测溶液。

优选的，所述制作标准曲线时，取芦丁20mg在120℃烘至恒重，用60wt％的乙醇溶液溶解稀释到200ml，取0～0.5ml，先加入5wt％亚硝酸钠溶液0.3ml，并放置6min，再加入60wt％的硫酸铝溶液0.3ml，并放置6min，然后加入4wt％氢氧化钠溶液4ml，最后用60wt％的乙醇溶液溶解稀释到10ml，放置15min，配制成若干不同浓度梯度的标准溶液。

优选的，所述制作出黄酮含量对比基准后，根据吸光度值与标准溶液的对应关系得到黄酮含量对应方程式，将待测溶液的吸光度值代入所述黄酮含量对应方程式即可得到该待测溶液的黄酮含量。

由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是“

1、本发明针对构树根中黄酮在460nm波长处对紫外光的吸收最大，确定460nm波长做为构树根中黄酮的吸光值，根据待测溶液在此波长处的吸光度值由黄酮含量对比基准即可查得该溶液的黄酮含量。因此利用本发明对构树根中的黄酮含量进行测定，测定结果准确性高，而且方法简单，易于操作。

2、本发明为构树根中黄酮的提取和分离提供了可行性依据，为进一步研究和利用构树根中的黄酮物质，提高构树的利用价值奠定了基础。

具体实施方式

下面结合具体的实施例，对本发明进一步进行阐述。

实施例1

(1)黄酮的提取：将构树根皮1000g切碎，在温度为80℃时烘烤25小时，并用85wt％的乙醇溶液浸泡12小时，提取上清液并浓缩制得浸膏189.965g，88.235ml。