[发明专利]一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法

权利要求书

1.一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：它采用下述几个步骤：

提取：采用茶叶加工的下脚料碎茶片、低档茶叶或夏秋茶的鲜叶或干叶为原料，采用经净化处理的纯水为溶媒液，料液比W/W＝1∶6-20，以逆流连续提取装置一次性提取，得到固形物含量为1.5-5％的茶水提取液；

过滤和超滤：将上述茶水提取液先用振动筛式过滤器连续过滤除去较大的碎茶片、泥沙等杂质；再用超滤膜装置分离去除大分子多糖、蛋白、鞣质，得到超滤透过液和截留液；

反渗透浓缩：将上述超滤透过液经反渗透装置循环浓缩，至固形物含量为8-20％，得浓缩液；

聚酰胺柱层析：将浓缩液加入预装好的高度/内径＝5-20∶1聚酰胺层析柱，依次用水以及浓度为容量百分比为1-45％、46-85％、86-99％的乙醇水溶液作为洗脱剂进行洗脱，分部收集不同乙醇浓度洗脱物，分别得到收集液K、D、E和F；K中主要含有多糖、蛋白等水溶性杂质，弃去，分别将上述收集液D、E和F经反渗透装置循环浓缩或减压蒸发浓缩，至固形物含量为10-20％，得收集浓缩液D′、E′和F′；收集浓缩液F′主要含有咖啡因，经进一步浓缩、结晶、干燥后得到纯度50-98％的咖啡因；

高速逆流色谱纯化分离：经HPLC分析检测，收集浓缩液D′主要含有非酯型儿茶素E-C、EGC和D-C，收集浓缩液E′主要含有酯型儿茶素EGCG、ECG、GCG和CG；分别将收集浓缩液D′、E′用高速逆流色谱纯化分离，以浓缩液D′中分离出非酯型儿茶素E-C，EDC和DC，从收集浓缩液E′中分离出酯型儿茶素EGCG、ECG、GCG和CG几种流出液，再分别收集对应的流出液；

浓缩、干燥：将纯化分离得到的不同组分的再收集的流出液分别真空浓缩至接近干燥并回收溶剂，回收的溶剂经蒸馏、精馏分离后和循环使用，经浓缩后的各种浓缩物再经真空或真空冷冻干燥后得到E-C、EGC、D-C、EGCG、ECG、GCG和CG七种儿茶素单体产品。

2.根据权利要求1所述的一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：步骤提取的特点是能采用夏秋茶的鲜叶或干叶为原料。

3.根据权利要求1所述的一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：过滤和超滤的特点是先用分级振动筛式过滤器连续过滤除去较大的碎茶片、泥沙等物理杂质；分级振动筛是一个密闭不锈钢设备，其中有5层筛网，其筛网从上至下分别为20目、30目、60目、80目、100目或120目；超滤膜装置采用陶瓷膜超滤设备。

4.根据权利要求1所述的一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：采用反渗透浓缩取代蒸发浓缩，至固形物含量为8-20％。

5.根据权利要求1所述的一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：所述聚酰胺柱层析是采用国产层析用聚酰胺分离材料，粒度为30-200目，柱子的高度/内径＝5-20∶1；四种洗脱剂分别是纯水，以及浓度容量百分比为1-45％、46-85％和86-99％的乙醇水溶液；每种洗脱剂的用量为2-5倍柱床体积BV。

6.根据权利要求1所述的一种从茶叶同时制备七种儿茶素单体的方法，其特征是：高速逆流色谱纯化分离，色谱条件为PTFE即聚四氟乙烯材质管柱，非酯型儿茶素E-C、EGC和D-C的制备分离溶剂系统为正丁醇-水，V/V＝1/3-3/1；酯型儿茶素EGCG、ECG、GCG和CG的制备分离溶剂系统为乙酸乙酯-水V/V＝1/3-3/1。