[发明专利]基因编码的红色荧光蛋白的分子设计方法

权利要求书

1.基因编码的红色荧光蛋白的分子设计方法，其特征在于包括有以下步骤：

1)通过分子设计方法将血红素氧化酶基因hol的终止子突变为非终止子密码子，并在该基因之后设计编码5～15个氨基酸的DNA片段，将其与血红素还原酶基因pcyA进行融合连接，得到相应的融合基因hol:pcyA；

2)将结合藻蓝胆素PCB的脱辅基蛋白色素结构域的基因片段，通过分子设计编码5～15个氨基酸的DNA片段，与步骤1)所得融合基因hol:pcyA再次融合，得到完整的融合功能基因，其能够编码可逆光致变色或非可逆光致变色的红色荧光蛋白；

3)将步骤2)得到的融合功能基因，转入外源生物细胞，在外源生物体正常表达时，得到具有可逆光致变色或非可逆光致变色的红色荧光蛋白。

2.根据权利要求1所述的基因编码的红色荧光蛋白的分子设计方法，其特征在于：血红素氧化酶基因hol和血红素还原酶基因pcyA融合后得到的融合基因hol:pcyA可合成藻蓝色素PCB。

3.按权利要求1或2所述的基因编码的红色荧光蛋白的分子设计方法，其特征在于所述的结合藻蓝胆素PCB的脱辅基蛋白色素结构域的基因片段为蓝藻光敏色素的色素结构域gaf或核膜连接蛋白的色素结构域apcE。

4.根据权利要求2或3所述的基因编码的红色荧光蛋白的分子设计方法，其特征在于：步骤1)和步骤2)中基因片段融合时，基因片段间间隔的氨基酸数目为5～15个，结合藻蓝胆素PCB的脱辅基蛋白色素结构域的基因片段与合成PCB的融合基因再次融合后，生成基因编码的红色荧光蛋白。