[发明专利]抗阿片肽的拮抗肽与该拮抗肽的应用

说明书

本申请是申请号为200710118104.2、申请日为2007年06月28日、发明创造名称为“一种抗阿片肽及其拮抗肽与该拮抗肽的应用”的分案申请。

技术领域

本发明涉及肽段及其编码基因与应用，特别是涉及一种具有拮抗吗啡抗伤害作用的抗阿片肽及其拮抗肽，与该拮抗肽在制备具有增强吗啡镇痛、逆转吗啡耐受和/或减弱或消除戒断症状作用的药物中的应用。

背景技术

众所周知，在世界范围内猖獗的贩毒吸毒活动已成为危害社会的一个毒瘤，严重干扰了有序的经济建设和社会安定，此外，静脉吸毒还造成了艾滋病人群感染率的攀升。目前，各国政府虽都加大联合打击毒品走私的力度，但吸毒、贩毒活动仍屡禁不止，其中一个重要的原因就是吗啡耐受及依赖的原理尚未真正或完全被阐明，国际上尚无有效的戒毒手段。国外最先采用的”替代疗法”是在戒毒过程中用美沙酮一类的药代替阿片，这种疗法将导致病人对美沙酮类药物的耐受和依赖。在国内，宁波戒毒所杨国栋先生采用东莨菪硷配合其它药物戒毒，也未完全解决心瘾问题。韩济生教授采用针灸治疗仪治疗戒断症状，试图通过特定频率的电脉冲刺激提高体内内源性阿片的合成来减轻症状，但它的最大缺陷是人群中针刺镇痛的有效率有限而且持续地针刺也存在耐受问题。近来，石家庄中医药专家王岩对阿片戒断症状进行辩症施治，采用“金甲丸”治疗戒断综合症，正在经临床进一步检验和完善。因此，迫切需要一种可从源头上彻底消除吗啡耐受及依赖，以及减弱或消除戒断症状的戒毒药物。

已知PEBP家族的蛋白，在自然界里广泛存在于酵母、线虫、果蝇及各种植物及哺乳动物的不同器官，它们极具保守性，与其它已知结构或功能的蛋白的序列无同源性。PEBP蛋白的生物功能十分多样，在植物它对开花信号及分生组织生长的信号起调节作用。在哺乳类动物，PEBP蛋白可通过Raf-1抑制MEK的磷酸化使之不被激活，故又有Raf激酶抑制蛋白(RKIP)之称，它调节Raf/MEK/ERK一组信号，与细胞的有丝分裂和分化有关，涉及肿瘤细胞的转移。在中枢神经系统，PEBP蛋白不仅作为海马刺激胆碱能神经肽(HCNP)的前身蛋白，而且也作为ATP，阿片和磷脂酰乙醇氨的结合蛋白。Ojika K.等人(Ojika K.，Mitake S.，Tohdoh N.，Appel S.H.，Otsuka Y.，Katada E.And Matsukawa N.(2000)Hippocampal cholinergic neurostimulating peptides(HCNP).Prog.Neurobiol.60，37-83.Iwase T，Ojika K，Matsukewa N，et al. Muscarinic cholinergic and glutamatergic reciprocal regulation of expressionof hippocampal choline

发明内容

本发明的目的是提供一种具有拮抗吗啡抗伤害作用的抗阿片肽。

本发明所提供的抗阿片肽，命名为21Kd，是下述氨基酸残基序列之一：

1)序列表中的SEQ ID NO：1；

2)将序列表中SEQ ID NO：1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加，具有拮抗吗啡抗伤害作用的多肽。

所述取代、缺失或添加的一至十个氨基酸残基可以是非结构域中的氨基酸残基，其改变不会对该蛋白的功能产生影响，例如，增加的组氨酸标签等。

序列表中的SEQ ID NO：1由186个氨基酸残基组成。

编码本发明抗阿片肽21Kd的基因，是下述核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ ID NO：2的DNA序列；

2)编码序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；

3)与序列表中SEQ ID NO：2限定的核苷酸序列具有90％以上同源性的核苷酸序列；

4)在高严谨条件下可与序列表中的SEQ ID NO：2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

所述高严谨条件为：用0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在65℃下杂交并洗膜。

序列表中的SEQ ID NO：2由558个碱基组成，编码具有序列表中SEQ ID NO：1的氨基酸残基序列的蛋白质。

试验表明，上述抗阿片肽21Kd具有一系列的活性片段，它们可为下述氨基酸残基序列之一：

1)序列表中的SEQ ID NO：3；

2)序列表中的SEQ ID NO：4；

3)序列表中的SEQ ID NO：5；