[发明专利]一种克伦特罗检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种克伦特罗检测试剂盒，其包括：

(1)包被了克伦特罗抗体的微量测试孔；

(2)克伦特罗标准溶液；

(3)清洗缓冲液；

(4)浓缩酶标记物；

(5)底物溶液A；

(6)底物溶液B；

(7)反应终止液；和

(8)酶标稀释液，

其中，将克伦特罗进行重氮化，再与牛血清白蛋白BSA进行偶氮连结，形成克伦特罗-BSA，作为制备多克隆抗体的免疫抗原，并且用该免疫抗原制备的多克隆抗体包被微量测试孔，以及

在酶标记物的制备中，将小分子克伦特罗先进行重氮化，再与辣根过氧化物酶HRP进行偶氮连接形成酶标抗原克伦特罗-HRP。

2.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述克伦特罗标准溶液浓度分别为0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL。

3.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述浓缩酶标记物的浓度为0.3μg/mL-1.0μg/mL。

4.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述包被了克伦特罗抗体的微量测试孔的制备过程中，克伦特罗抗体包被浓度为0.1-1μg/mL，包被体积为100μL。

5.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述清洗缓冲液为含有千分之五的吐温20的0.05moL/L的PBS。

6.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述底物溶液A用一定浓度的柠檬酸缓冲液，调pH值至4.5-5.0，加入千分之一至千分之五的30％的H₂O₂制得，而所述底物溶液B为8mg/mL-16mg/mL的四甲基联苯胺溶液，该溶液的溶剂为等体积混合的二甲亚砜和水。

7.根据权利要求1所述的克伦特罗检测试剂盒，其中，所述反应终止液为10％-15％的硫酸溶液。

8.一种检测样品中残留的克伦特罗的方法，该方法包括以下步骤：

(1)检测样品的制备；

(2)使用权利要求1～7中任一项所述的试剂盒检测克伦特罗；和

(3)分析检测结果。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，向包被了克伦特罗抗体的微量测试孔中加入克伦特罗标准溶液或样品溶液和酶标克伦特罗溶液，竞争反应后，用清洗缓冲液洗板后加入等体积混合的底物溶液A和B，显色，然后加入反应终止液终止，用酶标仪测定吸光度值，其中，所述酶标克伦特罗溶液为用所述酶标稀释液稀释浓缩酶标记物得到的溶液。

10.根据权利要求8所述的方法，其中，所述样品为尿液、血清、动物组织、器官或饲料。