[发明专利]一种双氢青蒿素液体制剂制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种双氢青蒿素液体制剂制备方法，属于医药领域。

背景技术

青蒿素是我国第一个有自主知识产权的单体一类新药，是从黄花蒿中分离出来的含有过氧基团的倍半萜内酯单体。继青蒿素之后，我国随后又成功研制了青蒿琥酯、蒿甲醚和双氢青蒿素3个一类新药，在该领域的研究和应用中处于世界领先地位。该类药物具有抗疟、抗血吸虫、抗孕、调节免疫等功能。其作用机理的研究也取得了很大进展。以抗疟作用为例，疟原虫吞噬血红蛋白后，在疟原虫体血红蛋白酶，主要是天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶等的催化下，疟原虫吸收的血红蛋白被降解成游离氨基酸，同时释放出血红素和少量游离铁。二价铁催化青蒿素类物质的过氧桥裂解，产生以青蒿素碳原子为中心的自由基和活性氧(reactive oxygen species，ROS)，自由基氧化破坏原虫的内膜系统和其生长所需要的大分子物质，从而导致疟原虫死亡。

近年研究发现青蒿素类药物还具有抗肿瘤作用。抗癌作用原理是抑制肿瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。研究表明青蒿素类药物能够使癌细胞阻滞在G1期，并影响细胞凋亡相关基因的表达，如使Bcl-2基因和PCNA基因表达降低、Bax蛋白表达升高，从而诱导肿瘤细胞凋亡。

有研究表明，青蒿素类药物对肿瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用远大于对正常细胞组织的毒性作用；对不同肿瘤细胞的作用强弱亦有较大差异，即该类药物具有较强的肿瘤特异性和细胞选择性。其原因可能是肿瘤细胞中铁的含量比正常细胞中高得多，且肿瘤细胞铁离子的吸收量与肿瘤细胞增殖呈正相关。细胞对铁离子的吸收是受体TfR(CD71)介导，铁转运蛋白-亚铁复合物结合受体一起影响细胞对铁的内吞。大多数肿瘤细胞表面含有丰富的转铁蛋白，而正常组织和细胞的TfR表达十分局限，仅限于表皮细胞、肝实质细胞、枯否细胞、睾丸有少量表达，大多数组织细胞不表达。青蒿素类药物的这一特性为其开发成为高效低毒的抗肿瘤药物带来了想象空间。

双氢青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)为青蒿素的还原产物，其分子式：C₁₅H₂₄O₅；分子量284.35；在上市的本类药物中药效最强、也最安全。青蒿素类药物在体内代谢的活性产物即为双氢青蒿素。然而由于该类药物的水溶性和脂溶性均较差，严重影响了其临床应用的效果。

发明内容

本发明目的在于提供一种有效提高双氢青蒿素溶解性的方法，解决其难溶于水的问题，为其临床抗肿瘤应用扫清障碍。

本发明的目的通过以下技术方案得以达成：首先将双氢青蒿素(DHA)溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，双氢青蒿素浓度达到20mg/ml，然后加入浓度为88％～100％(V/V)的乙醇，稀释到5～8mg/ml，最后加入聚乙二醇400，将双氢青蒿素稀释至≤2.5mg/ml，即可获得可以以任何比例与水混溶的双氢青蒿素液体制剂。

使用方法：上述双氢青蒿素制剂以任意比例混溶于水。

本发明的技术效果是：本发明双氢青蒿素液体制剂由于大大提高了双氢青蒿素的分散度，使其水溶性显著提高，本发明双氢青蒿素液体制剂作为抗肿瘤制剂可以显著抑制体外培养的白血病细胞株K562细胞的生长增殖从而使其抗肿瘤效果显著提高。

附图说明

图1为实施例1的细胞计数结果。各实验组经苔盼兰染色，镜下计数，计算细胞死亡率。图中：1、阴性对照组；2、溶剂对照组；3、阳性药物组；4、50ug/ml DHA组；5、25ug/ml DHA组；6、12.5ug/ml DHA组；7、5.6ug/mlDHA组。*，与阴性和溶剂对照组相比，差异具有显著性P＜0.05；#，与24hr组相比，差异具有显著性P＜0.05；$，与阳性药物组相比，差异具有显著性P＜0.05。

具体实施方式

实施例1：