[发明专利]一种同时检测人血液中的11个运动相关基因和4个内参基因的基因表达的方法

说明书

技术领域

本发明涉及同时检测人血液中的11个运动相关基因和4个内参基因表达情况的方法，属于医学分子生物学领域。

背景技术

基因在不同个体不同细胞间及不同生长阶段的选择性表达决定了生命活动的多样性，如发育与分化、衰老与死亡、内环境稳定、细胞周期调控等。比较个体间基因表达的差异能为我们揭示生命个体间某种能力的差异提供依据。我们研究运动员的运动相关基因表达情况，与非运动员对比分析，就能在一定程度上从分子水平揭示运动员之所以运动成绩优秀的原因。人的睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor，CNTF，NM_000614)有良好的促运动神经元生长作用，对外伤后运动神经元胞体的变性、死亡显示出明显的预防作用，并可调节血糖和血脂代谢，改善胰岛素水平(Sendtner M，Schmalbruch H，KA，et al.Ciliary neurotrophic factor prevents degeneration of motor neurons inmouse mutant progressive motor neuronopathy.Nature.1992，358(6386)：502-504)。肾上腺素能β2受体(adrenergic，beta-2-receptor，ADRB2，NM_000024)基因通过调控ADRB2与儿茶酚胺的结合位点而发挥调节脂肪水解供能作用，而脂肪水解供能又是耐力运动的重要能量代谢途径。(Wolarth B，Rivera MA，Oppert JM，et al.A polymorphismin the alpha2a-adrenoceptor gene and endurance ethlete atatus.Med Sci Sports Exerc.2000，32(10)：1709-1712.)。瘦素受体(leptin receptor，LEPR，NM_002303)通过与瘦素结合影响一系列机体代谢过程，如胰岛素的释放，葡萄糖的产生、转运、代谢及脂肪的分解合成等(Cohen SL，Halaas JL，Friedman JM，et al.Human leptincharacterization.Nature.1996，382(6592)：589.)。转化生长因子-β1(transforminggrowth factor，beta 1，TGFB1，NM_000660)生物学功能异常复杂，在多种组织细胞的增殖分化、间质形成、组织损伤修复、骨质再生、胚胎发生中起着关键性作用(李翠玲，崔正言.转化生长因子β分子生物学研究进展.国外医学，免疫学分册.1995，(3)：124-127.)。线粒体解偶联蛋白2(uncoupl ing protein 2，UCP2，NM_003355)的主要功能是参与线粒体ATP生成和活性氧的调控(Boss 0，Hagen T，Lowell BB.Uncouplingproteins 2 and 3：potential regulators of mitochondrial energymetabolism.Diabetes.2000，49(2)：143-156)。磷酸脂酶C-γ1(phospholipase C，gamma1，PLCG1，NM_002660)是磷脂酰肌醇信号通路的关键酶，在机体内分布极为广泛，在各种细胞中广泛存在，许多细胞外因子，如细胞表面抗原、免疫球蛋白、细胞因子、生长因子等都可以借助该酶的生化途径作用于细胞，调控细胞代谢(Rebecchi MJ，PentyalaSN.Structure，function，and control of phosphoinositide-specific phospholipaseC.Physiol.2000，80(4)：1291-1335)。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNFsuperfamily，member 2，NM_000594)具有广泛的生物学功能，运动可以改变机体和细胞内的能量代谢状态，TNF-α可能做为一种重要的调节因子参与机体的能量代谢的调节过程(焦广发，何玉秀.运动对肿瘤坏死因子-α的影响研究进展.中国运动医学杂志.2007，26(1)：116-119)。结合珠蛋白(haptoglobin NM_005143，HP)是一种重要的血管生成因子，它促进新生血管的内皮细胞生长和分化，Hp对侧枝血管的发育和组织修复也具有重要意义，Hp还具有调节机体免疫功能和抗菌作用等生物学功能(De Kleijn DP，SmeetsMB，Kemmeren PP，et al.Acute-phase protein haptoglobin is a cell migration factorinvolved in arterial restructuring.FASEB J.2002，16(9)：1123-1125)。RAD1同源物(RAD1，NM_002853)在保持基因组稳定性方面发挥重要监视作用，它既可以监视损伤激活细胞周期的调控，又在单碱基切除修复中发挥作用(Guan X，Bai H，Shi G，et al，Thehuman checkpoint sensor Rad9-Rad1-Hus1 interacts with and stimulates NEIL1glycosylase.Nucleic Acids Res.2007，35(8)：2463-2472)。缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1，alpha subunit；HIF1A，NM_001530)是在哺乳动物组织中广泛存在的转录因子，组织处于缺氧状态时它发挥重要的转录和基因调控作用，在运动员耐力训练中，骨骼肌中最先对缺氧状态发生反应的是HIF1A，它可以在分子水平上调糖酵解，促进组织适应缺氧环境(Mason S，Johnson RS.The role of HIF-1 in hypoxicresponse in the skeletal muscle.Adv Exp Med Biol.2007，618：229-244)。胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1，IGF1，NM_000618)作用于关节软骨，可刺激软骨细胞分裂增殖，作用于肌肉，可以刺激肌肉蛋白合成，促进细胞分化，促进成肌细胞和肌管生长，加速创伤肌肉的愈合(陈世益，李云霞，马昕，等.外源性胰岛素样生长因子-2促进骨骼肌损伤修复的实验研究.中国运动医学杂志.2002，21(4)：340-345)。这些基因在血液中都有表达。