[发明专利]纯化核酸、特别是来自固定组织的核酸的方法无效
申请号: | 200980149742.8 | 申请日: | 2009-11-20 |
公开(公告)号: | CN102245770A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 海克.尤廷;吉多.亨宁;亚历山大.伊兹梅洛夫 | 申请(专利权)人: | 西门子保健诊断股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 贾静环 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纯化 核酸 特别是 来自 固定 组织 方法 | ||
1.一种纯化生物试样的核酸的方法,包括下列步骤:
(a)将第一试样容器中的试样收集在水溶液中,并在非离液序列高的条件下裂解该试样;
(b)将第一磁性颗粒悬浮在该溶液中;
(c)将第一试样容器引入试样容器夹持器中,其中将该试样容器引入与该试样容器夹持器相关联的环形磁铁的环内部空间中;
(d)将溶液与磁性颗粒分开;和
(e)从溶液中分离核酸。
2.根据权利要求1的方法,其中所述磁性颗粒包括含硅涂层。
3.根据前述权利要求中任一项的方法,其中所述试样为血液试样。
4.根据权利要求1或2的方法,其中所述生物试样为包埋在石蜡中的试样和/或固定的试样。
5.根据前述权利要求中任一项的方法,其中在步骤(d)之前将溶液加热到至少50℃、优选至少60℃、更优选60~95℃。
6.根据权利要求5的方法,其中在步骤(d)之前,在加热所述试样之后,再将试样冷却至低于50℃。
7.根据前述权利要求中任一项的方法,其中所述试样在步骤(a)、(b)和(c)中的至少一步中与疏水性基质接触。
8.根据权利要求7的方法,其中所述第一试样容器由疏水性材料形成,并且起疏水性基质的作用。
9.根据前述权利要求中任一项的方法,其中在步骤(d)中所述溶液通过抽吸而与磁性颗粒分开。
10.根据前述权利要求中任一项的方法,其中步骤(e)包括将离液序列高的化合物加入所述试样中。
11.根据权利要求10的方法,其中步骤(e)还包括将未消耗的、具有含硅涂层的第二磁性颗粒悬浮在溶液中。
12.根据权利要求11的方法,其中步骤(e)还包括:
i)将试样接收在第二试样容器中,并加入离液序列高的化合物;
ii)将第二磁性颗粒悬浮在溶液中,并将核酸结合至第二磁性颗粒,
iii)将第二试样容器引入试样容器夹持器,其中将所述第二试样容器引入与试样容器夹持器相关联的环形磁铁的环内部空间中;和
iv)将溶液与磁性颗粒分开,并将核酸从磁性颗粒洗脱。
13.根据前述权利要求中任一项的方法,其中在将所述第一和/或第二试样容器引入所述与试样容器夹持器相关联的环形磁铁的环内部空间中时,所述各试样容器通过在环轴方向上的运动至少一次从环空间移出和再移入所述各试样容器。
14.实施根据权利要求1的方法的自动化系统,包括:
-用于至少一个试样容器的支架;
-可温控装置,其具有至少一个用于试样容器的槽;
-试样容器夹持器,用于接收至少一个试样容器;
-用于将试样容器夹持器从支架输送到可温控装置的设备;
-用于将液体从试样容器转移出和/或转移入试样容器的装置;
-用于控制输送装置、液体转移装置和用于控制可温控装置的温度的控制装置;
其中所述用于接收至少一个试样容器的试样容器夹持器具有至少一个环形磁铁,在该环形磁铁的环内部空间中可以接收试样容器。
15.试样容器夹持器,用于保持至少一个试样容器,该夹持器具有至少一个环形磁铁,在该环内部空间中可以保持所述试样容器。
16.根据权利要求15的试样容器夹持器,其中所述环形磁铁最狭窄位置处的环内部直径为4~20mm,优选6~12mm,更优选8mm。
17.根据权利要求15的试样容器夹持器,其中所述环内部空间具有圆锥形区域。
18.根据权利要求15的试样容器夹持器,具有多个用于试样容器的槽。
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