[发明专利]蛋白质纯化用分离剂和蛋白质纯化方法

权利要求书

1.一种蛋白质纯化用分离剂，其特征在于，选自由下述式(1)所示的配体和下述式(2)所示的配体组成的组中的1种或2种以上的配体通过氨基甲酸酯键结合到载体上，

上述式(1)中，m表示2～6的整数，

上述式(2)中，R₁和R₂分别独立地表示氢原子或碳原子数1～4的烷基，n表示1～6的整数。

2.根据权利要求1所述的蛋白质纯化用分离剂，其特征在于，式(1)所示的配体用下述式(3)表示，

上述式(3)中，m表示2～4的整数。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的蛋白质纯化用分离剂，其特征在于，式(2)所示的配体用下述式(4)表示，

上述式(4)中，R₁和R₂分别独立地表示氢原子或碳原子数1～4的烷基，n表示1～4的整数。

4.根据权利要求1至权利要求3中任一项所述的蛋白质纯化用分离剂，其特征在于，载体上的配体的含量为100μmol/ml载体以上。

5.根据权利要求1至权利要求4中任一项所述的蛋白质纯化用分离剂，其特征在于，载体是由交联高分子构成的载体。

6.一种蛋白质纯化用分离剂的制造方法，其特征在于，其为制造权利要求1至权利要求5中任一项所述的蛋白质纯化用分离剂的方法，

在有机溶剂中使载体与活化剂反应，将载体表面的羟基活化，然后在有机溶剂中使该活化载体与选自由下述式(5)所示的伯胺和下述式(6)所示的伯胺组成的组中的1种或2种以上的胺反应，

上述式(5)中，m表示2～6的整数，

上述式(6)中，R₁和R₂分别独立地表示氢原子或碳原子数1～4的烷基，n表示1～6的整数。

7.根据权利要求6所述的蛋白质纯化用分离剂的制造方法，其特征在于，式(5)所示的伯胺用下述式(7)表示，

上述式(7)中，m表示2～4的整数。

8.根据权利要求6或权利要求7所述的蛋白质纯化用分离剂的制造方法，其特征在于，式(6)所示的伯胺用下述式(8)表示，

上述式(8)中，R₁和R₂分别独立地表示氢原子或碳原子数1～4的烷基，n表示1～4的整数。

9.根据权利要求6至权利要求8中任一项所述的蛋白质纯化用分离剂的制造方法，其特征在于，活化剂为羰基二咪唑。

10.一种蛋白质纯化方法，其特征在于，将纯化目标蛋白质溶解于第一缓冲液中，在使该蛋白质溶液与权利要求1至权利要求5中任一项所述的蛋白质纯化用分离剂接触而吸附蛋白质后，向该分离剂中通入与第一缓冲液pH值不同的第二缓冲液，从而将吸附于该分离剂的蛋白质洗脱。