[发明专利]固定的产物耐受的微生物

权利要求书

1.一种用于在生物反应器中制备产物的方法，所述方法包括：

i)培养微生物，其中所述微生物被适应或诱变以表现出与对应的非适应或非诱变的微生物的产物耐受性相比对所述产物至少150％的产物耐受性；和

ii)收获所述产物。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述适应的微生物或突变的微生物表现出对所述产物至少200％的耐受性。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述微生物包括单个物种。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述微生物包括丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)、拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)、紫色梭菌(Clostridium puniceum)、糖丁酸梭菌(Clostridium saccharobutylicum)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、鹑鸡肠球菌(Enterococcus gallinarium)、金黄丁酸梭菌(Clostridium aurantibutyricum)、假破伤风梭菌(Clostridium tetanomorphum)或热解糖梭菌(Clostridium thermosaccharolyticum)。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述适应的微生物或突变的微生物是丙酮丁醇梭菌、糖丁酸梭菌或拜氏梭菌。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述产物是丁醇。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述丙酮丁醇梭菌、糖丁酸梭菌或拜氏梭菌表现出对至少2％丁醇的耐受性。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述微生物被固定在固体支持体上。

9.如权利要求8所述的方法，所述方法还包括以下步骤：通过使包含适应的细胞或突变的细胞的发酵培养基循环经过所述生物反应器来将所述适应的微生物或突变的微生物固定在所述固体支持体上。

10.如权利要求8所述的方法，其中所述微生物表现出与在液体培养基中表现出的产物耐受性相比在固体支持体上增强的产物耐受性。

11.如权利要求8所述的方法，其中所述固体支持体是半固体或固体。

12.如权利要求8所述的方法，其中所述固体支持体包括多孔材料。

13.如权利要求8所述的方法，其中所述固体支持体包括选自由以下组成的组的材料：骨炭、合成聚合物、天然聚合物、无机材料或有机材料。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述培养步骤包括使用串联或平行排列的至少两个生物反应器。

15.如权利要求14所述的方法，所述方法还包括在所述至少两个生物反应器的至少一个中使用悬浮培养。

16.如权利要求14所述的方法，所述方法还包括在所述至少两个生物反应器的至少两个中使用固定的培养物。

17.如权利要求14所述的方法，其中所述至少两个生物反应器的至少一个是连续培养。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述培养步骤包括以分批培养、补料-分批培养或连续培养来培养所述微生物。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述培养步骤是在填充床生物反应器或流化床生物反应器中进行。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述流化床生物反应器是膨胀床生物反应器。

21.如权利要求19所述的方法，其中所述培养步骤是在适合于以填充床或流化床模式操作的生物反应器中进行。

22.如权利要求21所述的方法，其中所述生物反应器包括：

a)填充床区，所述填充床区适合于容纳固体支持体；

b)床膨胀区，所述床膨胀区与所述填充床区接合，当以膨胀床模式操作所述生物反应器时，所述床膨胀区适合于容纳所述固体支持体；和

c)颗粒脱离区，所述颗粒脱离区与所述床膨胀区接合，所述颗粒脱离区适合于防止所述固体支持体从所述生物反应器中出去。

23.如权利要求22所述的方法，其中所述生物反应器还包括与所述填充床区接合的入口分配区。