[发明专利]一种粘土基荧光探针的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种无机-有机杂化荧光探针的制备方法，特别是一种粘土 基荧光探针的制备方法。

背景技术

荧光探针是指可以标记到生物分子上作为荧光检测探针的纳米发光颗 粒，将荧光探针用于各种医学和生命科学的分析检测中，表现出灵敏 度高、选择性好、所需样品量少等优势。目前已经开发的用于制备荧 光探针的荧光材料包括：荧光量子点、有机荧光素、稀土配合物等。 用于负载或固定荧光材料的基体材料包括：碳纳米管、硅胶，高分子 塑料等。用于制备荧光探针的主要制备方法是将荧光材料吸附、键合 、插入或被包覆到基体材料的表面或内部。

专利CN1884430公开了一种荧光碳纳米管及其制备方法和应用，其制备 方法为先用浓硫酸和浓硝酸的混合酸氧化碳纳米管，然后将聚阳离子 化合物吸附在碳纳米管管壁上，再将荧光量子点通过静电作用力组装 在碳纳米管上。该荧光碳纳米管使用的荧光材料为荧光量子点，具有 发光不稳定，易闪烁的缺点。荧光量子点与碳纳米管通过静电吸附作 用连接，降低了荧光碳纳米管的稳定性和荧光量子点的负载量。

专利CN1493647公开了一种功能性纳米稀土荧光微粒及其制备和应用， 其制备方法为以稀土配合物为发光中心，采用正硅酸乙酯在反相微乳 液体系中引发聚合，制得包裹稀土配合物的纳米硅胶荧光微粒，然后 在微粒表面导入活性官能团进行表面修饰。该荧光探针使用稀土配合 物作为荧光材料，具有发射光色纯度高、发光能力强、斯托克位移大 、荧光稳定性高等优点，但在表面修饰的过程中，可能会破坏硅胶外 壳导致所包裹的稀土荧光配合物泄露，使其荧光减弱。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于生物医药领域分析检测的性能稳定、 易于分 散、荧光强度高，易于进一步修饰或标记生物分子的粘土基荧光探针 的制备方法。

本发明一种粘土基荧光探针的制备方法如下，以下均以重量份表示：

（a）：将1份粘土分散在10~100份的有机溶剂中以50~100 kHz超声波 处理0.1~0.5小时后，加入0.1~10份的硅烷偶联剂，50~100℃下搅拌反 应5~50小时，抽滤并用有机溶剂反复洗涤，30~60℃真空干燥，然后取 1份在10~100份有机溶剂中以50~100 kHz超声波处理0.1~0.5小时后， 用氮气或氩气保护，翻口橡皮塞密封，缓慢加入α-卤代酰卤0.1~10份 ，在0~30℃下搅拌反应5~50小时，抽滤并用有机溶剂反复洗涤，30~6 0℃真空干燥，得到表面接有原子转移自由基聚合引发剂的粘土；

（b）：将表面接有原子转移自由基聚合引发剂的粘土1份，在50~100 份有机溶剂中以50~100 kHz超声波处理0.1~0.5小时后，加入1~10份 的单体，0.1~0.5份的催化剂，0.1~1份的配体，在氮气或氩气保护， 翻口橡皮塞密封，20~50℃温度下，搅拌反应10~100小时，离心分离并 用有机溶剂反复洗涤，30~60℃真空干燥，然后取1份在50~100份有机 溶剂中以50~100 kHz超声波处理0.1~0.5小时后，加入1~20份的丁二 酸酐，20~50℃下，搅拌反应10~100小时后，离心分离并用有机溶剂反 复洗涤，30~60 ℃真空干燥，得到侧基含有羧基的聚合物接枝的粘土 ；

（c）：将聚合物接枝的粘土1份，在50~200份的有机溶剂中以50~100  kHz超声波处理0.1~0.5小时后，用0.5 mol/L的NaOH水溶液调节体 系pH至6~8，加入含0.1~0.5份的感光剂的溶液，待充分分散后，缓慢 加入含0.1~0.5份的稀土离子的溶液，20~50℃下，搅拌反应1~10小时 后，陈化1~10小时，离心分离并反复洗涤，30~60℃真空干燥，得到一 种粘土基荧光探针。

本发明使用的粘土为埃落石、蒙脱土、凹凸棒土、海泡石或水滑石。

本发明使用的硅烷偶联剂为γ-氨基丙基三乙氧基硅烷、γ-氨基丙基 三甲氧基硅烷、N-β(氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷、N-β(氨乙基 )-γ-氨丙基甲基二甲氧基硅烷、N-β(氨乙基)-γ-氨丙基三乙氧基硅 烷或氨乙基氨乙基氨丙基三甲氧基硅烷。

本发明使用的α-卤代酰卤为α-溴代丁酰溴、α-溴代异丁酰溴、α- 溴代丙酰溴、α-氯代丁酰氯、α-氯代异丁酰氯或α-氯代丙酰氯。