[发明专利]一种脐带血间充质干细胞及其制备方法和用途无效
| 申请号: | 200910194915.X | 申请日: | 2009-09-01 |
| 公开(公告)号: | CN102002479A | 公开(公告)日: | 2011-04-06 |
| 发明(设计)人: | 刘广鹏;李宇琳;孙剑;张文杰;崔磊;曹谊林 | 申请(专利权)人: | 上海国睿生命科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08;C12N5/06;A61L27/38;A61L27/58 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 张睿 |
| 地址: | 200235 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 脐带血 间充质 干细胞 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种脐带血间充质干细胞的分离方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(1)将来自脐血的间充质干细胞的单细胞悬液和荧光标记的CD105单克隆抗体混合;和
(2)通过流式细胞仪分选得到CD105阳性(CD105+)的脐带血间充质干细胞。
2.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,步骤(1)中避光混合20-40分钟。
3.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述来自脐血的间充质干细胞选自第1、4、7、和/或10代细胞。
4.如权利要求3所述的分离方法,其特征在于,所述的来自脐血的间充质干细胞通过下述步骤得到:
(a)将脐血和淋巴细胞分离液混合、离心,得到白膜层细胞;和
(b)培养白膜层细胞,得到来自脐血的间充质干细胞。
5.如权利要求4所述的分离方法,其特征在于,步骤(b)中白膜层细胞培养在含有DMEM、胎牛血清、青霉素、链霉素、和L-谷氨酰胺的培养液中进行。
6.如权利要求1-5任一所述的分离方法,其特征在于,所述的脐带血是人脐带血。
7.一种脐带血间充质干细胞,其特征在于,所述的干细胞通过如权利要求1的分离方法得到,所述的脐带血间充质干细胞为CD105阳性(CD105+)。
8.一种如权利要求7所述的脐带血间充质干细胞的用途,其特征在于,(i)用作组织工程种子细胞;和/或(ii)用于制备组织工程化骨移植物。
9.一种组织工程化骨移植物,其特征在于,所述的移植物包括如权利要求7所述的脐带血间充质干细胞和医学上可接受的生物可降解材料。
10.一种如权利要求9所述的组织工程化骨移植物的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(1)将来自脐血的间充质干细胞的单细胞悬液和荧光标记的CD105单克隆抗体混合;
(2)通过流式细胞仪分选得到CD105阳性(CD105+)的脐带血间充质干细胞;和
(3)将步骤(2)得到的CD105阳性(CD105+)的脐带血间充质干细胞接种于医学上可接受的生物可降解材料,形成骨移植物。
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