[发明专利]检测乳及乳制品中疑似过敏原组分的过敏性的方法无效
| 申请号: | 200910174569.9 | 申请日: | 2009-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN101671717A | 公开(公告)日: | 2010-03-17 |
| 发明(设计)人: | 丛艳君;云战友 | 申请(专利权)人: | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
| 代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 | 代理人: | 黄 健 |
| 地址: | 010080内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 乳制品 疑似 过敏原 组分 过敏性 方法 | ||
1、一种检测乳或乳制品中疑似过敏原组分的过敏性的方法,该方法包括步骤:
将待测乳或乳制品配成样品溶液,与人嗜碱性粒细胞混合,培养,离心,检测上清组胺含量。
2、根据权利要求1所述的方法,其中,所述乳为牛乳、羊乳、驴乳或水牛乳;所述乳制品为全蛋白乳粉、水解蛋白乳粉或氨基酸配方乳粉。
3、根据权利要求1所述的方法,其中,所述人嗜碱性粒细胞为KU812F。
4、根据权利要求1所述的方法,该方法包括步骤:
将嗜碱性粒细胞悬于台式液中,加入含IgE的乳过敏患者血清溶液,在30~40℃下敏化2~6h,然后加入待测样品溶液,在30~40℃下孵育15~25min,然后离心测定上清组胺含量。
5、根据权利要求4所述的方法,其中,所述将嗜碱性粒细胞悬于台式液中使其中细胞浓度为(4~6)×106个细胞/ml台式液;所述台式液为:137mMNaCl,2.7mM KCl,1.8mM CaCl2,1.1mM MgCl2,11.9mM NaHCO3,0.4mMNaH2PO4,5.6mM葡萄糖,溶于蒸馏水中,pH 7.2。
6、根据权利要求4或5所述的方法,其中,所述含IgE的乳过敏患者血清溶液中IgE浓度为20~30μg/ml;每2ml细胞台式液中加入0.35~0.7ml含IgE的乳过敏患者血清溶液。
7、根据权利要求4或5所述的方法,其中,所述待测样品溶液中粗蛋白浓度为0.01μg/ml~10μg/ml;向每2.5ml敏化后的细胞悬液中加入8~12μl待测样品溶液。
8、根据权利要求1或4所述的方法,其中,所述离心条件为10℃以下温度1000rpm~2000rpm离心2min~10min。
9、根据权利要求1所述的方法,该方法还包括步骤:
将培养细胞用超声破碎,测定细胞内和细胞外的总组胺含量,计算所测乳及乳制品刺激嗜碱性粒细胞释放组胺的百分含量。
10、根据权利要求1或9所述的方法,该方法还包括步骤:
将所测乳或乳制品的检测结果与阳性对照和/或非过敏性对照检测结果进行比较,评价所测乳或乳制品的过敏性,或比较过敏性差异。
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