[发明专利]饱和脂肪链酸His-Gly-AA三肽酰胺及其合成方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及饱和脂肪链酸三肽酰胺，尤其涉及一系列具有免疫抑制活性的饱和脂肪链酸His-Gly-AA三肽酰胺，还涉及这些饱和脂肪链酸三肽酰胺的制备方法以及它们作为免疫抑制剂的应用，属于生物医药领域。

背景技术

据统计，截至2002年底，全球共进行各种器官移植935792例次，其中肾移植585877例次、肝脏移植112153例次、心脏移植66559例次。此外，胰、肺、小肠等器官移植及心-肺、胰-肾、肝-肾、肝-肠等多脏器联合移植也都获得成功并应用于临床。目前，肾移植1年人/肾存活率达90％～95％，5年存活率超过70％。脏器移植要形成移植耐受，这就要求患者终身服用免疫抑制剂。器官移植的进展在很大程度上取决于免疫抑制剂的进展。近几十年，虽然新免疫抑制药物使得器官移植在临床取突飞猛进发展，但它们的毒副作用，例如肾毒性和骨髓抑制作用仍然是器官移植造必须面对的严重问题。

环孢菌素A是目前临床常用的免疫抑制剂。由于环孢菌素A的水溶性极差以及肾毒性很强，所以无论是剂型还是疗效都不尽人意。提高环孢菌素A制剂的水溶性，降低环孢菌素A的肾毒性，一直是环孢菌素A研究的热点。尿毒素肽具有免疫抑制活性。发明人认识到，把尿毒素肽与脂肪链酸缀合生成的酰胺具有自组装性能，因而可以用作具有免疫抑制活性的载药材料。例如可以用来包裹环孢菌素A，达到提高环孢菌素A的水溶性和降低环孢菌素A肾毒性的双重目的。

发明内容

本发明的目的之一是，将尿毒素三肽与脂肪链酸缀合，得到具有免疫抑制活性的饱和脂肪链酸三肽酰胺缀合物。

本发明的目的之一是通过以下技术方案实现的：

通式I的12种具有免疫抑制活性的饱和脂肪链酸His-Gly-AA三肽酰胺

CH₃(CH₂)_n-CO-His-Gly-AA  I

其中，通式I中的AA为Glu或Lys，n为6、8、10、12、14或16。

本发明的目的之二是，提供一种制备上述具有免疫抑制活性的饱和脂肪链酸His-Gly-AA三肽酰胺的方法。

本发明的目的之二是通过以下技术方案来实现的：

一种制备通式I的12种具有免疫抑制活性的饱和脂肪链酸His-Gly-AA三肽酰胺的方法，该方法包括：

(1)按照现有液相合成技术，通过逐步接肽合成的His-Gly-AA的保护中间体，其中AA为谷氨酸或赖氨酸；

(2)脱去His-Gly-AA的保护中间体的N端保护基；

(3)将C端保护基保护的His-Gly-AA中间体与饱和脂肪酸缩合，所述饱和脂肪酸为CH₃(CH₂)_nCOOH，n＝6、8、10、12、14或16；

(4)脱去C端保护基得到目标化合物。

其中所述N端保护基是对多肽的N端进行保护时常用的保护基团，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)，苄氧羰基(Z)；所述C端保护基是对多肽的C端进行保护时常用的保护基团，例如可以是苄氧基(OBzl)；所述液相合成技术及所述保护、缩合、脱保护的过程是本领域的常规并公知的技术。

当AA为Glu时，所述饱和脂肪酸三肽缀合物的制备方法可以用图1的路线概括，具体的，所述方法包括：

(1)在(Boc)₂O和NaOH存在下将甘氨酸转化为N-叔丁氧羰基甘氨酸；

(2)在(Boc)₂O和三乙胺存在下将组氨酸转化为N-叔丁氧羰基-N^im-叔丁氧羰基-组氨酸；

(3)在DCC、HOBt、无水THF存在下将γ-苄酯-谷氨酸苄酯与N-叔丁氧羰基甘氨酸缩合，生成N-叔丁氧羰基甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯；

(4)在氯化氢-乙酸乙酯中将N-叔丁氧羰基甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯脱除叔丁氧羰保护基，生成甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯；

(5)在无水THF中，在DCC和HOBt存在下将甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯与N-叔丁氧羰基-N^im-叔丁氧羰基-组氨酸缩合，生成N-叔丁氧羰基-N^im-叔丁氧羰基-组氨酰甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯；

(6)在氯化氢-乙酸乙酯存在下将N-叔丁氧羰基-N^im-叔丁氧羰基-组氨酰甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯脱除叔丁氧羰基生成组氨酰甘氨酰γ-苄酯-谷氨酸苄酯；