[发明专利]一种提取分离原花青素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物医药保健领域，具体涉及一种分离提纯原花青素的方法要。

背景技术

原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC)是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。原花青素有改善血液循环、治疗糖尿病性视网膜病、减轻水肿、美白皮肤和抑制静脉曲张等功效，在欧洲花青素已用于临床治疗几十年。

天然产物中存在两种最基本的原花青素单体，一种为儿茶素，另一为表儿茶素，这两种单体通过聚合可形成寡聚体或多聚体，按聚合度的大小通常将二～四聚体称为低聚体，英文为Oligomeric procyanidins，简称OPCs或PCOs，五聚体以上则称为高聚体Procyanidolic polymers(PPC)。近年来，国内外学者对OPCs的理化特性和生物特性进行了大量的研究工作，并取得突破性进展，在原花青素的提取分离上，也有大量的文献报道。

在原花青素的提取主要是利用有机溶剂或水溶液(CN100384832C、CN1613854A、CN 1176919C)、酸溶液(CN 1193995C、CN 1169804C)或超临界CO₂体系(CN 1264729A、CN 1107110C、CN 1749253A)中将原料中的低聚原花青素提取出来，其中有的文献用到微波辅助提取(CN 1102589C)。有机溶剂提取，只能提取植物本体中的低聚原花青素，而高聚原花青素大部分还留在植物本体中。酸水可以将高聚原花青素降解成二聚体或三聚体甚至单体，然后提取出来，但是，同时会把原料的低聚体原花青素降解，而原花青素单体的抗氧化作用远远小于二聚体和三聚体原花青素，造成药效流失。超临界CO₂和微波辅助手段有助于提高原花青素的提取率，但是作用有限，而且往往还要求苛刻的工艺条件，不但造成生产成本的增加，还会造成部分原花青素的分解。

原花青素的分离提纯主要有树脂吸附或柱层析法(CN100384832C、CN 1923830A、CN 1253446C、CN 1169804C)、逆流萃取法(CN 1176919C)和膜分离法(CN 101100464A)和抗溶剂法(CN1613854A)，其中树脂吸附柱层析法和膜分离法主要是针对提取物中的一些糖类而采用的，而逆流萃取法利用原花青素和杂质在两种不同溶剂中的分配比不同达到分离目的，由于不同聚合度的原花青素在两种溶剂的分配比也不尽相同，所以，分离效果有限，工艺收率低。

发明内容

本发明的目的是提高一种率效高，分离效果好的提取分离原花青素的方法。

本发明以富含原花青素的植物本体为原料，经过皮仁分离、碱水提取、有机溶剂萃取、水相中和、浓缩，加入甲醇提取其中的低聚原花青素，过滤，滤液蒸干干燥，得到低聚原花青素产品；滤饼干燥，得到高聚原花青素。

植物本体往往含有很多的糖类、蛋白质和脂肪等，如果提取是将整个葡萄籽或沙棘籽粉碎、脱脂，然后提取，提取物的杂质含量较大，要得到纯度较高的产品，就必须增加复杂的分离程序，这样不但增加了生产成本，而且由于生产工序的增加，会或多或少的造成目标产物的损失或降解。如果能在提取之前对原料进行适当的预处理，分离除去原料中不含目标产物或目标产物含量较少的那部分，不但可以减少工艺的程序，增加原料的处理量，而且可以提高产品的品质。在本发明中，利用目前成熟的设备皮仁分离器将葡萄籽或沙棘籽进行皮仁分离，然后对原花青素含量丰富的籽皮进行提取，由于籽皮中糖类和蛋白质等含量很少，在提取之后，可以不进行柱层析或膜分离等工艺，而得到纯度较高的原花青素产品。

目前，原花青素通常采用有机溶剂或酸水提取。有机溶剂提取只能提取植物本体中的低聚原花青素，大部分高聚原花青素还留在植物本体中。酸水可以将高聚原花青素降解成二聚体或三聚体甚至单体，然后提取出来，但是，同时会把原料的低聚体原花青素降解，而原花青素单体的抗氧化作用远远小于二聚体和三聚体原花青素，造成药效流失。我们在实验中发现，原花青素在碱水中比在有机溶剂和酸水中具有更大的溶解度，可以把低聚和高聚原花青素一起提取出来，提取率大，而且在工艺条件下原花青素化学稳定，不易发生变质或降解。

本发明的具体操作步骤如下：