[发明专利]氨基功能化双核壳结构磁性荧光编码微球的制备方法

权利要求书

1.氨基功能化双核壳结构磁性荧光编码微球的制备方法，其具体步骤如下：

A.室温的条件下，制备水相的超顺磁性氧化铁纳米粒子MNs和两种颜色可分的表面带有巯基羧酸类基团的水相半导体量子点QDs₁和QDs₂；

B.用反相微乳液法对水相的氧化铁纳米粒子和一种表面带有巯基羧酸类基团的水相半导体量子点QDs₁进行二氧化硅包覆，形成MNs-QDs₁/SiO₂核壳结构，并用带有氨基的硅烷偶联剂对其表面进行氨基修饰，制备得到氨基修饰的单色MNs-QDs₁/SiO₂核壳结构的磁性荧光微球；

C.将氨基修饰的单色MNs-QDs₁/SiO₂核壳结构的磁性荧光微球与另一种表面带有巯基羧酸类基团的半导体量子点QDs₂混合，并采用反相微乳液法进行第二次二氧化硅包覆，制备得到具有双核壳结构的磁性荧光编码微球；

D.用带有氨基的硅烷偶联剂和三羟硅基-3-丙基甲膦酸酯对双核壳结构的磁性荧光编码微球进行功能化修饰，得到可用于免疫分析的氨基功能化的双核壳结构的磁性荧光编码微球。

2.如权利要求1所述的氨基功能化双核壳结构磁性荧光编码微球的制备方法，其特征在于：步骤A中，水相的超顺磁性氧化铁纳米粒子MNs的浓度为0.01～0.1M；水相半导体量子点QDs₁和QDs₂的浓度为0.0015～0.01mM。

3.如权利要求1所述的氨基功能化双核壳结构磁性荧光编码微球的制备方法，其特征在于：步骤B中，所述的制备氨基修饰的单色MNs-QDs₁/SiO₂核壳结构的磁性荧光微球，是在20℃～40℃温度条件下，首先将10～500μL超顺磁性氧化铁纳米粒子水溶液与100～1000μL巯基羧酸类基团修饰的一种颜色的量子点水溶液混合，然后同5～10ml的油相环己烷、1～3ml的助表面活性剂正己醇、1～3ml的表面活性剂Triton X-100、30～200μL的正硅酸乙酯一起加入到容器中，搅拌30～60min后加入50～100μL质量分数比浓度为20％～40％的氨水和20～100μL、0.05％～0.10v/v％的邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯水溶液，再搅拌24～36小时后形成混合的W/O型微乳液，在该微乳液的乳滴中通过正硅酸乙酯的水解生成二氧化硅壳，然后加入10～50μL带有氨基的硅烷偶联剂进行表面修饰，继续搅拌24～36小时；再向容器中加入10～20ml的丙酮进行破乳，停止搅拌后离心使反应物沉淀分离出来，用有机试剂和水洗涤沉淀产物，然后分散于水中，进而得到粒度为20～50nm范围内氨基修饰的单色MNs-QDs₁/SiO₂核壳结构的磁性荧光微球溶液，有机试剂为甲醇或乙醇。

4.如权利要求1所述的氨基功能化双核壳结构磁性荧光编码微球的制备方法，其特征在于：步骤C中，是在20℃～40℃温度条件下，首先将100～1000μL氨基修饰的单色核壳结构的磁性荧光微球溶液与100～1000μL巯基羧酸类基团修饰的另一种颜色的量子点水溶液混合，然后同5～10ml的油相环己烷、1～3ml的助表面活性剂正己醇、1～3ml的表面活性剂Triton X-100、30～200μL的正硅酸乙酯一起加入到容器中，搅拌30～60min分钟后加入50～100μL、质量分数比浓度为20％～40％的氨水和20～100μL、0.05％～0.10v/v％的邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯水溶液，搅拌24～36小时后形成混合的W/O型微乳液，在该微乳液的乳滴中通过正硅酸乙酯的水解生成第二层二氧化硅壳，从而得到粒度在40～100nm范围内的双核壳结构的磁性荧光编码微球溶液。