[发明专利]小鼠FcγRⅢ线性配体结合表位

说明书

一.技术领域：

本发明涉及分子生物学、免疫学和生物信息学领域，特别是涉及小鼠FcγRIII(Fc GammaReceptor III)线性配体结合表位多肽。 

二.背景技术：

Fc受体(FcR)为特异亲和免疫球蛋白(Ig)Fc片段的细胞表面分子，小鼠FcγR有四种类型，分别为FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)、FcγRIII(CD16)和FcγRIV，其胞外区结构相似，均含有两个(FcγRII和FcγRIII)或三个(FcγRI)Ig样结构域，属Ig超基因家族，而跨膜区和胞内区则存在明显差异。FcγRIII是高度糖基化膜蛋白，为中低亲和力IgG受体，在生理条件下只能结合IgG复合物或多聚体。moFcγRIII胞内区与FcR γ链二聚体、T细胞受体(T cell receptor，TCR)ζ链二聚体或FcRγ链-TCRζ链异源二聚体相连，通过这些亚基的ITAM基序进行信号转导，FcRγ链或TCRζ链为FcγRIII在细胞表面表达所必需，只有通过共转染FcR γ链或TCRζ链，才能在细胞表面表达FcγRIII。γ-chain具有信号传导功能，通过二硫键与FcγRIII结合，介导FcγRIII的表达。 

Fc受体广泛表达于免疫辅助细胞和效应细胞，具有许多重要的生理功能，是体液免疫与细胞免疫的联系纽带，在机体免疫调节中起关键作用。抗体介导的炎性反应可通过激活型和抑制型FcR进行调节，因此FcR是治疗过敏和自身免疫性疾病理想的药物靶标。根据FcγR功能的不同，提高或降低FcγR-IgG结合的亲和力可以达到相应的FcγR免疫治疗目的。激活型受体的胞内区(FcγRIIA)或者FcR γ链(FcγRI、FcγRIII、boFcγ2R、moFcγRIV、FcαRI和FcεRI)含有基于酪氨酸的受体活化基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)，能激活免疫效应细胞，诱导吞噬作用(phagocytosis)、抗体依赖细胞毒作用(antibody-dependentcellular cytotoxicity，ADCC)、补体依赖细胞毒作用(complement-dependent cellularcytotoxicity，CDCC)、细胞裂解(cytolysis)、分泌细胞因子和其它炎性因子以及调节淋巴细胞增殖和分化等多种免疫学效应。可溶性FcγR重组蛋白在体外可阻断免疫复合物与B细胞的结合，因此在体内可与免疫细胞表面FcγR竞争结合IgG，抑制免疫复合物对细胞的激活；同理， 高剂量的非特异IgG也可与体内免疫复合物竞争结合表达FcγR的免疫细胞，静脉内免疫球蛋白治疗方法(intravenous immunoglobulin therapy，IVIG)已应用于血小板减少(immunethrombocytopenic purpuria，ITP)、全身性红斑狼疮(systemic lupus erythematodes，SLE)和多组织硬化(multiple sclerosis，MS)等疾病的免疫治疗。IgG Fc-FcγRIII晶体结构的解析以及对信号转导机制的了解为发现新的特异、高效药靶提供了更多的信息和途径，人们利用肽库筛选、组合化学(combinatorial chemistry)、生物信息学以及合成多肽等筛选和鉴定了多种IgG Fc片段的抑制性多肽，其中抑制Fc-FcγR结合的TG19320三肽四聚体在小鼠体内显现对肾小球肾炎良好的抑制功效。Medgyesi等在人IgG1Fc片段中鉴定了诱导细胞信号传导的功能性多肽，来源于CH2区Pro234-Ser298的多肽与细胞表面FcγRIIB特异结合，可诱导细胞分泌细胞因子和ERK的磷酸化，并能抑制BCR介导的Ca²⁺反应。然而，小分子多肽对受体的亲和力远远低于完整的抗体分子，多肽亲和力的提高等问题尚有待解决。 

三.发明内容：

本发明要解决的主要技术问题是：提供一种小鼠FcγRIII线性配体结合表位多肽，为鉴定本发明的多肽在体外的抑制活性，分别进行了多肽对小鼠IgG-可溶性受体结合的抑制和小鼠IgG-细胞表面受体结合的抑制，表明线性表位多肽对小鼠FcγRIII亲和小鼠IgG显现出良好的抑制功效。 

本发明的技术方案是：