[发明专利]香椿组培快繁技术及培养基的配比

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物的组培快繁技术，确切地说是一种香椿的组培快繁技术，以及繁育所用培养基的配比。 

背景技术

植物组织培养是指植物的所有器官、组织和细胞，在人为的控制条件下，放入含有植物营养和调节剂等组成的培养基中，让其生长、分化形成完整植株的过程。其理论依据是植物细胞的全能性。植物组织培养与快繁技术近几年飞快发展，已广泛应用在花卉、林果、蔬菜以及农作物上，并产生了巨大的经济效益。 

培养基是植物快繁的关键，培养基的配比，是因作物的不同而异，是随植物的不同生长和发育阶段而有区别。作物不同生长发育所需的营养物质也不尽相同。每一种作物只有适应它自身的生长条件和环境条件才能生存，反之则亡。因此，香椿各个生长发育阶段的培养基配比，也就是说，香椿的诱导与分化培养、继代与增殖培养、壮苗与生根培养中培养基的配比，只适宜香椿各个生长阶段，因此，筛选合适的培养基是至关重要的。 

过去生产香椿苗的常规方法是，①用根系进行繁殖，但由于根量太少，育苗量较低，且每年只能繁育一次，发展迟缓；②用种子繁殖幼苗，会使单株之间的内部形态和外部形状及生长速度呈现不一致性，造成品质、营养含量相差太大。 

作为食用型香椿，它菜、材兼用，鲜嫩的芽菜口感好，香味浓郁，富含大量蛋白质、维生素等营养物质，是大众餐桌上的美味佳肴。由于其本身是一个高度的杂合体，后代分离严重的原因，导致了品质的 多异性和形态及特征的不一致性，所以只有采用无性组织快繁，才能从根本上解决种质和纯度的一致性问题。 

发明内容

本发明的目的是提供一种香椿的无性营养体组织培养与脱毒快繁技术，并筛选出适宜该品种分化、增殖、生根的最佳培养基配比，以实现不受季节限制，多次、快速、大量繁殖，并且保证原品种全部的遗传性和该品种品质的一致性。 

本发明的组培繁育方法是： 

1、分化诱导培养 

从正在生长的植株中，选择生长健壮，无病虫，具有本品种特征特性的植株，剪取当年生半木质化腋芽饱满的枝条，去掉可见叶，在流动的自来水中冲洗，拮干水分。在无菌室内的超净工作台上，进行灭菌后，再用无菌水冲洗，然后剪成1.0-1.5cm长含有1-2个腋芽的茎段，快速接种到分化诱导培养基中，封口后作好标记，迅速转到培养室内进行分化诱导培养。培养温度26±℃，湿度65-75％，光照强度1800-2200LX，光照时间12-14h/d。经过25-28天的分化培养，芽长出3-5片叶，高度3-5cm时，可进行单株继代增殖快繁。 

2、增殖培养 

将生长健壮的无菌芽苗切成含有1-2个节间的小段，长1-1.5cm，转入增殖培养基中进行增值培养，在培养室内通过28天的增殖培养的组培苗，此时可进行继代繁殖，继代周期为28-30天，如此反复，短期内即可获得大量芽苗。培养温度26±℃，湿度65-75％，光照强度1800-2200LX，光照时间12-14h/d。 

3、生根培养 

选取生长势强、健壮的无菌芽苗切成含有1-2个节间的小段长1.0-1.5cm转入生根培养基中，25天左右，有95％以上的植株长出3-5 条0.3-3cm长的根，展开叶3-5片，待苗长至30-35天时，即可炼苗移栽。培养温度26±℃，湿度65-75％，光照强度1800-2200LX，光照时间12-14h/d。 

4、炼苗与移栽 

练苗前首先揭开培养瓶的封口膜，练苗时间5-7天，练苗时在保证温、湿度的条件下，逐步接近自然环境，以利提高成活率，然后小心取出，用自来水冲洗净苗基部的培养基，并灭菌，然后移栽到已灭过菌的腐殖质与碎炉渣以1∶2的比例混合的基质中，前期适当遮阴并保持湿度在85-95％，逐步降至70％，15天后去掉薄膜罩，定期杀菌，7-10天一次，共计2-3次。 

本发明的培养基及配比： 

由基本培养基、生长调节剂附加蔗糖和琼脂组成分化诱导培养基、增值培养基和生根培养基，基本培养基为MS，基本培养基MS的配制方法为公知技术，生长调节剂分别由6-苄基腺嘌呤(6-BA)、a-萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)、赤霉素(GA3)组合而成。 

1、分化诱导培养基的配比是：基本培养基1升、6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.5-3.0mg，a-萘乙酸(NAA)0.5-3.0mg，赤霉素(GA3)0.5-3.0mg，蔗糖30g，琼脂6-8g；