[发明专利]λ干扰素在抗人类免疫缺陷病毒中的应用

说明书

技术领域

本发明属于抗病毒药物领域，具体地说，本发明涉及一种新型干扰素——λ干扰素(interferon lambda，IFN-λ)在抗人类免疫缺陷病毒(HIV-1)中的应用。

背景技术

人类免疫缺陷病毒(HIV)是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的病因，病人以CD4+T细胞减少为主要特征，同时伴有反复机会感染、恶性肿瘤以及中枢神经系统退行性病变。在HIV/AIDS疫情爆发的二十七年间，全球约有6500万人感染了HIV，其中2500万人已经死亡。如果不对HIV/AIDS疫情采取防治措施，它将演化为一场历史性的灾难，估计到本个十年结束时将产生数百万的新感染人数。

由于HIV主要入侵CD4+T细胞和单核-吞噬细胞，且依赖感染细胞内多种活性分子而大量复制，使宿主CD4+T细胞数量剧减和功能受损，导致严重免疫缺陷。据此，以设计若干治疗方案：①阻断或抑制HIV对细胞内成分的利用；②给予IL-2、IL-12，抑制促炎细胞因子产生，扩增CD4+和CD8+T细胞；③应用高活性抗体及转录病毒治疗(HAART)，通过终止病毒感染所致免疫缺陷并一定程度促进免疫功能重建，可明显改善HIV感染者预后，降低机会性感染率和早起死亡率；④应用治疗型疫苗，增强机体抗HIV应答，减少抗病毒药物用量。目前美国FDA批准25种抗逆转录病毒药物，但很多抗病毒药物由于毒副作用和长期应用的耐药性而限制了其临床应用，如临床上常用于齐多夫定(zidovudine)有骨髓抑制反应，奈韦拉平(nevirapine)对肝功能损害，蛋白酶抑制剂茚地那韦(indinavir)有严重的消化道症状，等等；同时也发现在进行HAART疗法时出现HIV-1的耐药毒株，极大地影响了治疗效果。因此，抗病毒药物研究具有重要的实际意义，寻找一种高效、安全、副作用少的抗病毒药物的研究势在必行。实践证明，干扰素(IFN)是抗病毒感染的第一道防线，I型和II型干扰素不仅可抑制病毒和肿瘤，而且还能参与天然免疫反应和获得性免疫反应。最近干扰素家族增添一位新成员：III型干扰素即IFN-λ，已发现其与其他型干扰素一样具有抗病毒作用，如：乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)等，通过激活干扰素信号通路，导致抗病毒蛋白的产生，这些蛋白包括双链RNA活化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PKR)、2′-5′寡腺苷酸合成酶(OAS)基因家族和Mx蛋白，从而发挥抗病毒效能。但IFN-λ抗HIV作用经科技查新还未见报道。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种λ干扰素在体外抗人类免疫缺陷病毒感染中的应用(一种λ干扰素在抗人类免疫缺陷病毒中的应用)，该干扰素细胞毒性弱，抗HIV-1作用显著，且具有多种抗病毒途径，抗HIV-1作用与其他型别干扰素相似。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

1、IFN-λ的获得：IFN-λ1/λ2均为含178个氨基酸、分子量19.8kDa的蛋白质，其制备参见文献(Kotenko SV，Gallagher G，Baurin VV，et al.Nat Immunol，2003，4(1)：69-77)，且IFN-λ1/λ2已商品化，本实验所用IFN-λ1/λ2购于PeproTech公司，SDS-PAGE和HPLC分析其纯度达98％以上；

2、IFN-λ对HIV-1靶细胞-人巨噬细胞的毒性：分化成熟的人巨噬细胞加入不同浓度(浓度从1ng/ml到1000ng/ml)的IFN-λ1/λ2，培养72小时，通过MTS法检测IFN-λ1/λ2的细胞毒性作用，选择无毒或弱毒浓度的IFN-λ1/λ2进行随后的抗HIV-1作用研究；

3、IFN-λ1/λ2抗HIV-1活性的测定：