[发明专利]电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法无效
申请号: | 200910053876.1 | 申请日: | 2009-06-26 |
公开(公告)号: | CN101654675A | 公开(公告)日: | 2010-02-24 |
发明(设计)人: | 吉永华;左小潘;周智磊;杨宏天;姜峰 | 申请(专利权)人: | 上海大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/435;C12P19/34 |
代理公司: | 上海上大专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 陆聪明 |
地址: | 200444*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 电压 门控 通道 基因 编码 蛋白 及其 克隆 方法 | ||
1.一种电压门控钠通道基因,其特征在于该基因具有下列核苷酸序列之一:
(1).具有SEQ NO 1所示的DNA序列;
(2).与序列表中序列1限定的核酸序列具有95%以上的同源性,且编码相同功能蛋白质的DNA序列。
2.一种根据权利要求1所述的电压门控钠通道基因的编码蛋白,其特征在于该编码蛋白具有序列表中序列2的氨基酸残基序列或者是将序列18-28的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与序列14-26的氨基酸残基序列相同活性的由序列2衍生的蛋白质。
3.一种根据权利要求1所述的电压门控钠通道基因的克隆方法,其特征在于该方法的具体步骤为:
a.从东亚钳蝎的腹神经纤维中提取总RNA;
b.用Superscript II反转录酶和Oligo-(dT)引物合成单链cDNA;
c.借鉴昆虫Para钠通道的保守氨基酸残基设计退火引物,再采用兼并PCR以及cDNA末端的快速扩增技术,得到全长cDNA;所述的退火引物为下表所示:
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