[发明专利]IgY免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法

权利要求书

1.一种卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征在于经过PEG沉淀和氯仿抽提后，将上述粗提的抗体沉淀经PBS溶解后直接上凝胶色谱柱。对纯化后的IgY免疫球蛋白进行纯度和杀菌性能测定。

2.根据权利要求1所述的卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征是，第一步粗提过程为：取蛋黄(去除蛋清和蛋黄膜)，加入PEG6000搅拌，可以去除卵黄中的脂蛋白。同时使用氯仿抽提，即加入1/4蛋黄体积的氯仿，充分搅拌混合均匀后，离心取上清。

3.根据权利要求1所述的卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征是，第二步凝胶层析过程为：根据溶质分子在流动相溶剂中的体积大小不同而达到分离的目的，我们将上述分离的IgY抗体经PBS稀释后直接上Sephadex G-75柱子。通过凝胶色谱层析后可以得到高纯度的IgY抗体。

4.根据权利要求1所述的卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征是，经过抗体粗提和凝胶色谱层析后，对纯化的IgY抗体进行纯度和杀菌性能测定。

5.根据权利要求4所述的卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征是，通过SDS-PAGE凝胶电泳鉴定纯化后抗体的纯度。

6.根据权利要求4所述的卵黄免疫球蛋白的PEG与凝胶色谱联用纯化方法，其特征是，取适量的此IgY卵黄抗体与适当浓度的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共同倒平板培养，通过抑菌圈的大小检测IgY抗体的杀菌活性。