[发明专利]以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法

权利要求书

1、以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于包括如下步骤和工艺条件：

(1)半纤维素的水解：将农业废弃物粉碎至20-100目，按照农业废弃物与水解酸溶液的固液比为1g∶10-20mL加入水解酸溶液，于110-140℃下水解1-3h得到半纤维素水解液；

(2)解毒预处理：包括Ca(OH)₂处理和吸附处理；

Ca(OH)₂处理：向水解液中加入Ca(OH)₂粉末，调节其pH至10.0-12.0，保持1-1.5h后，过滤，用酸将滤液pH调节为5.5-6.0，静置1-2h，离心10-20min除去沉淀；

吸附处理选自步骤a、b和c吸附中的一种：

a.活性炭吸附：按照活性炭与Ca(OH)₂处理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入活性炭，在30-40℃下搅拌处理1-2h后过滤除去活性炭；

b.离子交换树脂吸附：按照离子交换树脂与Ca(OH)₂处理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入离子交换树脂，在30-40℃下搅拌处理1-2h后过滤除去离子交换树脂；

c.大孔树脂吸附：按照大孔树脂与Ca(OH)₂处理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入大孔树脂，在30-40℃下搅拌处理1-2h后过滤除去大孔树脂；

(3)发酵培养基制备：解毒预处理后的水解液在减压条件下，于60-70℃下浓缩至还原糖浓度为80-120g/L，然后按照其在混合物中的浓度添加如下物质：1.2-2.4g/L蛋白胨、0.25-0.75g/L酵母粉、0.4-0.6g/L MgSO₄·7H₂O、1.5-2.5g/L KH₂PO₄、0.003-0.005g/LMnSO₄·H₂O和0.0001-0.0002g/L CuSO₄·5H₂O，用酸调节pH至6.0-6.5，经灭菌后作为发酵培养基；

(4)按体积比5-15∶100于发酵培养基中接入发酵性丝孢酵母种子液，在25-28℃培养7-9天，离心收集菌体，经有机溶剂提取方法获得微生物油脂。

2、根据权利要求1所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述有机溶剂提取方法为：按每克干菌体加入10mL浓度为3.5-4.5mol/L HCl，于80-100℃处理30-60min；冷却后按体积比为2∶1加入的氯仿和甲醇混合溶剂进行萃取，收集氯仿层，用旋转蒸发仪减压去除有机溶剂，得到微生物油脂。

3、根据权利要求2所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述HCl的浓度为4mol/L。

4、根据权利要求1所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述农业废弃物为水稻秆、小麦秆、高粱秆、玉米秸秆、蔗渣或玉米芯。

5、根据权利要求1所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述水解酸为硫酸、盐酸或磷酸。

6、根据权利要求1所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述步骤(2)Ca(OH)₂处理中酸为硫酸、盐酸或磷酸。

7、根据权利要求1所述的以农业废弃物为原料发酵生产微生物油脂的方法，其特征在于所述步骤(3)发酵培养基制备中调节pH所用的酸为硫酸、盐酸或磷酸。