[发明专利]海滨锦葵皂甙的制备工艺及用途

说明书

一.技术领域

本发明属于生化分离技术领域，具体涉及海滨锦葵皂甙的制备工艺及用途

二.背景技术

海滨锦葵(kostelezkya virginica)是锦葵科锦葵属多年生宿根盐生植物，天 然分布于美国东部沿海盐沼海岸带。1992年由南京大学引种至中国。有文献报 道，海滨锦葵的花、叶、根部可食用。尤其是根部可生食、可烹炸、可作茶饮， 焙干碾碎可用作糖果和口香糖原料，以增加胶粘度。根部浸出液可浓缩至蛋清状 替代蛋清使用。皂甙(Saponins)又名皂苷或者皂素，是固醇或三萜类化合物的 低聚配糖体总称，因其水溶液能形成持久泡沫，像肥皂样而得名。它们是糖的衍 生物，主要是由糖的半缩醛羟基与非糖物质结合的化合物，非糖部分称为甙元， 又称为配糖体。甙元根据其化学结构可分为甾体和三萜类。皂甙可以抑制血清中 脂类氧化，抑制过氧化脂质对肝脏的损伤，防止动脉硬化，因而它具有免疫调节 的作用。它可提高NK细胞、LAK细胞的数量，增强肌体免疫力。皂甙对核酸 和蛋白质合成有促进作用，可增加肝、肌肉组织中蛋白质与DNA的含量，提高 机体的耐力，因而具有抗疲劳作用。皂甙还可以抑制肿瘤细胞的生长，具有消肿 抗炎症的作用。皂甙因其重要的生物学作用，受到很多研究者重视，尤其对人参 皂甙、大豆皂甙以及其他类植物皂甙的研究有大量论文和专利。但从海滨锦葵中 提取锦葵皂甙以及对锦葵皂甙的研究论文很少见到，专利至今未有。

根据我们的研究结果证明锦葵皂甙是一种三萜类皂甙，在锦葵根部含量较 高。从生物学实验证明，锦葵皂甙具有免疫调节的生物学功能。可作为人体非特 异性免疫增强剂，促进体液免疫及细胞免疫，加强抗体或补体生成。该皂甙可制 成片剂、口服液、胶囊等作为保健食品给免疫低下者使用，促进他们的健康。也 可进一步制成药品，供免疫低下或肿瘤病人辅助治疗使用。

三.发明内容

本发明需要解决的问题是从海滨锦葵的根中提取出锦葵皂甙，并利用锦葵皂 甙的生物学功能将其制成片剂、胶囊、口服液等保健食品，供免疫力低下者使用。 也可制成药品供病患者使用。

本发明技术方案

1.海滨锦葵皂甙提取工艺：採集海滨锦葵新鲜根，洗净、晒干或烘干，粉碎。 取干粉，按比例1∶15加入蒸馏水，用超声仪加温超声提取。超声条件：功率 200瓦，温度60℃，时间1小时。超声后用纱布过滤。同样条件再重复一次；两 次滤液合并。将滤液蒸发部分后，得浓缩液。加入乙醇使最终浓度为70％。搅拌 几次后低温静置10-12小时，虹吸取上清，将上清(70％乙醇提取液)减压浓缩 去乙醇，得锦葵皂甙粗提液。用大孔吸附树脂再进行分离。按常规方法将大孔吸 附树脂进行处理，装柱；然后将锦葵皂甙粗提液上柱，上样结束后，先用蒸馏水 洗涤去杂质，然后用40％乙醇洗涤其他物质，最后使用80％乙醇洗脱，得到含有 锦葵皂甙的醇洗脱液，将此溶液旋转蒸发去乙醇，得到精制的含锦葵皂甙的浓缩 液。该溶液可根据需要处理，可直接用原液作原料使用，也可将原液做成冻干粉 存放备用。

2.锦葵皂甙的生物学功能

锦葵皂甙的抗肿瘤试验

表1锦葵皂甙对HEP-S细胞增殖的影响

P*＜0.05

3.锦葵皂甙的测定：高氯酸-香草醛法

经研究分析，锦葵皂甙为三萜类皂甙，依据三萜类皂甙在高氯酸作用下能与 香草醛产生颜色反应，在546nm处有最大吸收。锦葵皂甙含量可通过参比皂甙标 准品曲线，计算含量和纯度。

香草醛试剂：4％；4.0克香草醛，加入100ml冰乙酸溶解即可。

准确吸取1.0mg/ml皂甙标准液0.0，0.025，0.035，0.050，0.075，0.10ml 于具塞试管内，加甲醇补足0.10ml，分别加4％香草醛试剂0.4ml，再加高氯酸 0.8ml，混匀，密塞，置于60℃水浴中加热15分钟，取出，立即用冷水冷却5分 钟，再各管加入冰乙酸5.0ml，摇匀，静置10分钟。546nm处测定光吸收值。以 浓度对光吸收值作标准曲线。锦葵皂甙样品同法配制1.0mg/ml浓度的样品液， 取0.01，0.02，0.05ml，补加甲醇至0.10ml，其余操作同标准曲线。将测定出的 光吸收值对比标准曲线计算样品的锦葵皂甙含量。