[发明专利]产β-1,3-葡聚糖酶的微生物及应用

权利要求书

1.产β-3-葡聚糖酶的微生物，分类命名为壳聚糖酶产生菌H12(Mitsuariachitosanitabida H12)，保藏号为CGMCC 2949，保藏日期为2009年3月13日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.权利要求1所述的产β-1，3-葡聚糖酶的微生物在制备β-1，3-葡聚糖酶中的用途，用壳聚糖酶产生菌H12菌体发酵培养粗酶液制备β-1，3-葡聚糖酶粗酶制剂。

3.如权利要求2所述的产β-1，3-葡聚糖酶的微生物在制备β-1，3-葡聚糖酶中的用途，其特征在于所述壳聚糖酶产生菌H12菌体发酵培养粗酶液的制备方法如下：

发酵培养基为：1-2％w/v的安琪酵母，pH 6-7，121℃高压灭菌30min； 按3-5％体积比的接种量接种壳聚糖酶产生菌H12，30℃，160rpm，摇床培养15h-18h，得粗酶液。

4.一种β-1，3-葡聚糖酶粗酶制剂的制备方法，将权利要求3制得的壳聚糖酶产生菌H12菌体发酵粗酶液，4000-5000rpm离心25-30min，取上清，加入固体硫酸铵到浓度为70-75％，w/v，单位：g/ml；8000-10000rpm离心25-30min，所得沉淀放入半透膜的透析袋里，扎紧袋口置于pH 6.0的0.01mol/L醋酸缓冲液1000mL的烧杯中，在冰箱中透析过夜，其间更换醋酸缓冲液4次；移出透析袋中的酶液，放在-20℃冷冻过夜，置于冻干机中冷冻干燥24-48h，得β-1，3-葡聚糖酶粗酶制剂，剂型为干粉。