[发明专利]江蓠多糖的制备方法

权利要求书

1.一种江蓠多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)、将采集的江蓠藻冲洗干净，弃去杂藻和污物，50℃～100℃烘干、粉碎成藻粉；藻粉加入5倍量以上的水进行加热提取，60℃以上提取30分钟以上，降至室温，过滤，得滤液①；

(2)、在滤液中按每公斤江蓠藻粉加入10～20万国际单位比活力的裂解酶进行酶解，pH值为6.0～9.0，酶解温度为30℃～60℃，酶解时间为30～210分钟；酶解结束后调pH值至3.0～4.0，按每公斤江蓠藻粉加入10～20万国际单位比活力的蛋白酶进行酶解，搅匀后，维持pH值在3.0～4.0，45℃～50℃的条件酶解，酶解时间为450～510分钟，酶解结束后加热至90℃～100℃进行酶灭活，酶灭活时间为5～20分钟；

(3)、降至室温，过滤，收集滤液；对滤液调节pH值至5.5～7.0；加入95％的乙醇至乙醇的体积浓度为10％～20％，室温静置3.0小时以上；

(4)、离心，过滤，收集滤液，加入95％乙醇醇沉至乙醇的体积浓度为40％～80％，室温静置3.0小时以上；

(5)、醇沉后的溶液过滤，取沉淀物，沉淀物分别用95％乙醇和丙酮洗2次，真空干燥，即得江蓠多糖。

2.根据权利要求1所述的江蓠多糖的制备方法，其特征在于：该制备方法还包括以下步骤：

(6)、取步骤(5)所制得的江蓠多糖，加入10倍量以上的水搅拌进行溶解，离心，过滤，取过滤液；

(7)、将过滤液用DEAE层析柱进行层析分离，用10～30mmol/L，pH5.5～7.0磷酸盐缓冲液进行洗脱；

(8)、收集层析分离后的目标物，用截留分子量为5～100KD的超滤膜进行超滤，收集截留液；

(9)、截留液加入95％乙醇醇沉至乙醇的体积浓度为40％～80％，室温静置3.0小时以上；

(10)、醇沉后的溶液进行离心，过滤，沉淀分别用95％乙醇和丙酮洗2次，进行真空干燥，即得江蓠多糖。

3.根据权利要求1所述的江蓠多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)还包括有：滤渣加入4倍重量以上的水进行酶解提取，按每公斤江蓠藻粉加入10～30万国际单位比活力的复合酶进行酶解，所述复合酶含有重量比为2～1∶1～2的纤维素酶和半纤维素酶；维持pH值在3.0～5.5，酶解温度为30℃～60℃，时间为60～250分钟；酶解结束后加热进行酶灭活，酶灭活温度为90℃～100℃，酶灭活时间为5～20分钟，降温，过滤，得滤液②；所述步骤(2)中裂解酶酶解的为滤液①和滤液②的合并滤液。

4.根据权利要求1所述的江蓠多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的裂解酶为褐藻胶裂解酶、海藻酸裂解酶、果胶酸裂解酶或果胶酸酯裂解酶。

5.根据权利要求1所述的江蓠多糖的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)中过滤包括，先用滤布进行粗过滤，再用高速冷冻离心机进行离心，再进行抽滤。

6.根据权利要求2所述的江蓠多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中的过滤过程为：用高速冷冻离心机离心，倒出上清液，收集沉淀至容器中，用95％的乙醇来洗，用抽滤器抽干。