[发明专利]选择性富集翻译后修饰的蛋白和/或肽无效
| 申请号： | 200880117644.1 | 申请日： | 2008-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN101874037A | 公开（公告）日： | 2010-10-27 |
| 发明（设计）人： | R·霍夫曼;H·M·维泽;E·P·罗米恩 | 申请（专利权）人： | 皇家飞利浦电子股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/13;C07K1/36 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 李波;谭祐祥 |
| 地址： | 荷兰艾*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 选择性 富集 翻译 修饰 蛋白 | ||
1.用于从样品选择性富集和/或分离翻译后修饰的蛋白和/或肽的方法，包括：
(a)对样品中包含的蛋白和/或肽进行单或双化学标记；
(b)捕获翻译后修饰的蛋白和/或肽的亚组，所述蛋白和/或肽的亚组包含要分析的特定翻译后修饰；和
(c)分离捕获的翻译后修饰的蛋白和/或肽的亚组，
其中所述要分析的翻译后修饰是糖基化。
2.权利要求1的方法，进一步包括：在进行步骤(a)之前和/或与进行步骤(a)同时将蛋白切割成肽。
3.权利要求1或2的任一项的方法，其中双标记包括同位素和同量异位素标记。
4.权利要求3的方法，其中在同量异位素标记之前进行同位素标记。
5.权利要求3或4的方法，其中在将蛋白切割成肽之前进行同位素标记。
6.权利要求1-5的任一项的方法，其中步骤(b)包括凝集素亲和捕获和糖蛋白化学捕获中的至少一种。
7.权利要求1-6的任一项的方法，其中步骤(c)包括从至少第一亚组的分离的翻译后修饰的蛋白和/或肽除去翻译后修饰。
8.权利要求7的方法，其中化学或酶促除去翻译后修饰。
9.权利要求7或8的方法，其中第一亚组的分离的翻译后修饰的蛋白和/或肽包括N-糖基化蛋白和/或肽。
10.权利要求9的方法，其中通过肽：N-糖苷酶F，酶促除去糖基化。
11.权利要求7-10的任一项的方法，其中在进行步骤(c)后，使蛋白分子的其余亚组进行另外的步骤(a)-(c)的循环，并且其中步骤(c)包括从至少第二亚组的蛋白分子除去翻译后修饰。
12.权利要求11的方法，其中第二亚组的分离的翻译后修饰的蛋白和/或肽包括C-糖基化蛋白和/或肽。
13.权利要求1-12的任一项的方法，进一步包括：通过质谱分析分离的蛋白和/或肽。
14.权利要求1-13的任一项的方法，其中该方法以高通量形式进行。
15.权利要求1-14的任一项的方法用于进行定性和/或定量蛋白组分析的用途。
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