[发明专利]合成5’UTR、表达载体以及增强转基因表达的方法

权利要求书

1.一种嵌合多核苷酸，其包含第一多核苷酸片段和第二多核苷酸片段，其中：

a.所述第一多核苷酸片段包含肌质网/内质网钙ATP酶基因的第2内含子；

b.所述第二多核苷酸片段包含酪蛋白基因的5’非翻译(5’UTR)区的至少一部分；和

c.所述第一多核苷酸片段位于所述第二多核苷酸片段的5’端。

2.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段还包含肌质网/内质网钙ATP酶基因的外显子2的至少一部分。

3.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段还包含肌质网/内质网钙ATP酶基因的外显子3的至少一部分。

4.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段是犬SERCA2基因、人SERCA2基因或小鼠SERCA2的片段，所述第二多核苷酸片段是牛β-酪蛋白基因、小鼠β-酪蛋白基因、大鼠β-酪蛋白基因或绵羊β-酪蛋白基因的片段。

5.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段与SEQ ID NO：2和4-6之一具有至少80％相同，所述第二多核苷酸片段与SEQ ID NO：3和8-10之一具有至少80％相同。

6.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段包含与含有SEQ ID NO：4的至少60个连续核苷酸的多核苷酸具有至少80％相同的多核苷酸，所述第二多核苷酸包含与含有SEQ ID NO：3的至少30个连续核苷酸的多核苷酸具有至少80％相同的多核苷酸。

7.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸包含SEQ ID NO：2，所述第二多核苷酸包含SEQ ID NO：3。

8.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸包含SEQ ID NO：4，所述第二多核苷酸包含SEQ ID NO：3。

9.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述嵌合多核苷酸与SEQ ID NO：1具有至少80％相同。

10.如权利要求1所述的嵌合多核苷酸，其特征在于，所述嵌合多核苷酸与SEQ ID NO：7具有至少80％相同。

11.一种真核表达载体的合成5’UTR多核苷酸组件，其包含第一多核苷酸片段和第二多核苷酸片段，其中：

a.所述第一多核苷酸片段包含第一真核基因的至少一个剪接位点；

b.所述第二多核苷酸片段包含第二真核基因的5’非翻译区(5’UTR)的至少一部分；和

c.所述第一多核苷酸片段位于所述第二多核苷酸片段的5’端。

12.如权利要求11所述的合成5’UTR多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段包含所述第一真核基因的内含子。

13.如权利要求12所述的合成5’UTR多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段还包含所述第一真核基因5’侧接外显子的至少一部分。

14.如权利要求12所述的合成5’UTR多核苷酸，其特征在于，所述第一多核苷酸片段还包含所述第一真核基因3’侧接外显子的至少一部分。

15.如权利要求11-14中任一项所述的合成5’UTR多核苷酸，其特征在于，所述第一真核基因是真核肌质网/内质网钙ATP酶基因，所述第二真核基因是酪蛋白基因。

16.如权利要求1-14中任一项所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸缺少下列限制性内切酶的识别序列：AsiS I、Pac I、Sbf I、Fse I、Asc I、MIu I、SnaB I、Not I、Sal I、Swa I、Rsr II、BsiW I、Mfe I、Nhe I、Nsi I、Cla I、Nde I、Nsi I、Kpn I、Nco I和Pst I。

17.如权利要求1-14中任一项所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸在5’端和3’端包含限制性位点以帮助克隆入载体。

18.如权利要求16所述的多核苷酸，其特征在于，所述嵌合多核苷酸在5’端包含Mlu I的识别序列和在3’端包含Mfe I的识别序列。