[发明专利]昆虫组织酶解物及其在昆虫病原线虫人工培养上的应用

说明书

技术领域

本发明属于植物害虫生物防治领域，具体地说涉及一种昆虫组织酶解物，以及昆虫组织酶解物在昆虫病原线虫人工培养上的应用，还涉及含有昆虫组织酶解物的昆虫病原线虫培养基。

背景技术

昆虫病原线虫是一类重要的生物杀虫剂，它随寄主昆虫的食物或从昆虫自然开口、节间膜进入昆虫体内，在昆虫血腔中释放自身携带的共生菌，共生菌分泌的毒性因子造成昆虫患败血症死亡。昆虫病原线虫寄主范围较广，能主动搜寻寄主，因此对土栖和钻蛀等隐蔽性害虫具独特防治优势；同时具有可大量人工培养和对人、畜、环境安全等优点。在工业化国家昆虫病原线虫制剂占生物农药市场销售额的13％，仅次于苏云金杆菌产品。澳大利亚、美国、德国、荷兰、加拿大等国家均有一些昆虫病原线虫产品广泛用于防治农林、牧草、花卉、和卫生等重要害虫。

昆虫病原线虫虽然在20多年前就实现了商业化生产，但由于存在线虫生产成本高和线虫质量不稳定等问题，限制了其在生产上的应用。线虫培养技术主要集中于线虫产量、质量和成本，一般通过优化培养基和培养条件可提高线虫产量，从而降低生产成本和提高线虫质量。如专利《酶解培养基培养昆虫病原线虫的方法》(专利号为：ZL200410096044.5)公开了一种固体培养线虫的淀粉酶酶解培养基，主要是在以淀粉为主要成分的培养基中加入淀粉酶；此方法使线虫产量大幅提高、收获期提前，线虫的收获率和清洁度也得到提高。但是仍然存在生产成本高，且所生产的线虫质量不高等问题。另外，在培养基中加入昆虫物质或寄主物质可复壮菌株和提高产量(刘石泉等，微生物学通报，2008，35(7)：1091-1095。吴友良，江苏蚕业，2003，3：10-11。常韶华等，中国生物防治，1998，14(3)：105-106)。但是在培养基中昆虫表皮的存在会大大降低线虫清洁度，增加线虫收获时的清洗难度。

发明内容

本发明目的在于提供一种昆虫组织酶解物。

本发明另一目的在于提供上述昆虫组织酶解物在昆虫病原线虫人工培养上的应用。

本发明还一目的是提供含有上述昆虫组织酶解物的昆虫病原线虫培养基。

实现本发明的技术方案如下：

本发明一种昆虫组织酶解物，按照如下方法制备：将昆虫组织和水加入到匀浆器中，匀浆，再加入蛋白酶进行水解反应，然后过滤，弃残渣，所得滤液即为昆虫组织酶解物。

上述昆虫组织酶解物的制备方法，包括将昆虫组织和水加入到匀浆器中，匀浆，再加入蛋白酶进行水解反应，然后过滤，弃残渣，所得滤液即为昆虫组织酶解物。

所述的蛋白酶的添加量因所添加蛋白酶的种类和蛋白酶的活性的不同而不同，一般蛋白酶的添加量占昆虫组织干物质重的重量百分比为0.5～20％。所述的昆虫组织干物质重可以通过计算得到，一般昆虫组织干物质重为昆虫鲜重的30～40％或昆虫干粉重的90～95％。

上述蛋白酶进行水解反应的时间因蛋白酶的种类和蛋白酶活性的不同而不同；通常蛋白酶的水解反应时间为10～180min。

所述的蛋白酶是指可以催化分解蛋白质肽键的蛋白质水解酶，如酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶等。所述的酶均可自市场上购买。

上述蛋白酶进行水解反应的温度为所述酶活性最高时的温度；可按照所购酶说明书上所标明的温度进行。

所述的昆虫组织可以是昆虫组织干粉或活体昆虫。所述的昆虫干粉是将昆虫幼虫干燥，然后粉碎即得。

所述的昆虫病原线虫是指可进行人工培养的昆虫病原线虫，如芜菁斯氏线虫(Steinernema feltiae)，小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocapsae)，格氏斯氏线虫(Steinernema glaseri)，大异小杆线虫(Heterorhabditis megidis)，嗜菌异小杆线虫(Heterorhabditis bacteriophora)等。

所述的昆虫是指可进行人工培养或容易获得、繁殖成本低的昆虫，优选可人工饲养且蛋白质含量较高的昆虫；进一步优选为所培养线虫的寄主昆虫；如小木蠹蛾、蝇蛆、蚕蛹、玉米螟、大蜡螟、菜青虫、米蛾、棉铃虫、黄粉虫、桃小食心虫等。

所述的组织匀浆器是指可以破碎昆虫组织的工具；匀浆器可自市场上购买。

所述的过滤是指用孔径小于匀浆后昆虫组织的滤网进行，如尼龙网、绸布或纱布等。

上述昆虫组织酶解物在昆虫病原线虫人工培养上的应用。

所述的应用是指将昆虫组织酶解物作为昆虫病原线虫培养基的组份。