[发明专利]一种肿瘤组织全抗原的制备方法和用途有效

专利信息
申请号: 200810201438.0 申请日: 2008-10-21
公开(公告)号: CN101724010A 公开(公告)日: 2010-06-09
发明(设计)人: 朱学军;范振芳;李晓惠;孙雪梅 申请(专利权)人: 江苏省中医院
主分类号: C07K1/14 分类号: C07K1/14;C07K14/47;A61K39/00;A61P35/00
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 徐迅;张睿
地址: 210029 江苏省南*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 肿瘤 组织 抗原 制备 方法 用途
【权利要求书】:

1.一种肿瘤组织全抗原的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:

(1)将肿瘤活检组织的4-10%甲醛固定的石蜡包埋样本和二甲苯混合,使石 蜡溶解,得到含有肿瘤组织的溶液;

(2)将含有肿瘤组织的溶液离心、得到沉淀1;

(3)将沉淀1和pH小于7的碳酸钠水溶液混合0.5-12小时,离心除去液 体得到沉淀2;

(4)将沉淀2置于水蒸汽中进行灭活细胞浆中蛋白酶的处理10-30分钟, 得到灭活了细胞浆中蛋白酶的肿瘤组织;

(5)将步骤(4)得到的肿瘤组织进行匀浆处理,得到乳糜状液体;和

(6)将乳糜状液体和水溶液混合得到肿瘤组织全抗原;所述水溶液包括生理 盐水、RPMI-1640、DMEM、和PBS;

所述肿瘤为淋巴瘤。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中将沉淀1和pH 小于5的碳酸钠水溶液混合0.5-12小时。

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)中的水蒸汽温度为 100-150℃。

4.一种肿瘤疫苗的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:

(a)将肿瘤活检组织的4-10%甲醛固定的石蜡包埋样本和二甲苯混合,使石 蜡溶解,得到含有肿瘤组织的溶液;

(b)将含有肿瘤组织的溶液离心、得到沉淀1,并除去二甲苯;

(c)将沉淀1和pH小于7的碳酸钠水溶液混合0.5-12小时,离心除去液 体得到沉淀2;

(d)将沉淀2置于水蒸汽中进行灭活细胞浆中蛋白酶的处理10-30分钟, 得到灭活了细胞浆中蛋白酶的肿瘤组织;

(e)将步骤(d)得到的肿瘤组织进行匀浆处理,得到乳糜状液体;

(f)将乳糜状液体和水溶液混合得到肿瘤组织全抗原;所述水溶液包括生理 盐水、RPMI-1640、DMEM、和PBS;和

(g)将树突状细胞和步骤(f)得到的肿瘤组织全抗原混合、培养,得到肿 瘤疫苗;

所述肿瘤为淋巴瘤。

5.一种如权利要求1-3任一所述的制备方法得到的肿瘤组织全抗原。

6.一种疫苗组合物,其特征在于,所述的组合物包括如权利要求5所述的肿 瘤组织全抗原和树突状细胞。

7.一种如权利要求4所述的制备方法得到的肿瘤疫苗。

8.如权利要求5所述的肿瘤组织全抗原的用途,其特征在于,用作或被用于 制备肿瘤疫苗。

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