[发明专利]一种用于口腔黏膜组织癌变趋势检测的试剂盒及其使用方法

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学的领域，具体涉及一种用于口腔黏膜组织癌变趋势检测的试剂盒及其使用方法。

背景技术

口腔黏膜病(oral mucosal disease)是发生在口腔黏膜及软组织上的类型各异、种类众多的疾病的总称[李秉琦，周曾同.口腔黏膜病学(第二版).北京：人民卫生出版社.2005，1-15]。口腔黏膜病具有同一病变的损害在病变的不同阶段可以发生不同类型的损害的特点，具有同一疾病在口腔黏膜的不同部位具有不同的临床表现的特点，具有多同黏膜病共存的特点，具有发病原因多不清楚的特点。同时，口腔白斑(oral leukoplakia，OLK)、口腔红斑(oralerythroplakia，OEK)、口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)、口腔粘膜下纤维化(oralsubmucous fibrosis，OSF)、上皮异常增生等口腔黏膜病是口腔磷状上皮细胞癌(Oral squamouscell carcinomas，OSCC)的癌前病变。OLK的发病率约为3-6％，中年以上的男性多见，癌变率为3-5％；OEK的发病率约为0.05％，41-50岁的男性多见，癌变率为52％；OLP的发病率约为0.51％，好发于中年人，女性多于男性，癌变率为0.4-12.3％。

口腔黏膜病的诊断除了从临床病损进行横向比较进行诊断和鉴别诊断外，还常需要结合病理检查进行诊断。但是，由于病损的重叠与更迭性，有时病损也难以确诊，因此，需要在临床上进行治疗性诊断。总之，由于口腔黏膜病的种类的多样性、临床表现的复杂性、现有诊断方法的滞后性、部分疾病的癌变性等特点，急需建立可行、可靠的临床诊断方法，特别是建立判定口腔黏膜病癌变趋势大小判定的临床诊断方法。

发明内容

本发明提供了一种用于口腔黏膜组织癌变趋势检测的试剂盒及其使用方法。

本发明采用如下的技术方案实现：

一种用于口腔黏膜组织癌变趋势检测的试剂盒，其特征在于由以下试剂组成：TRIZOL、氯仿、异丙醇、乙醇、Oligo(dT)₁₅、试剂I、试剂II、试剂III-a、试剂III-b、试剂III-c、试剂III-d和试剂III-e。

其中试剂I由MgCl₂、Tris-HCL+KCL、RNase Free dH₂O、dNTP Mixture、RNase Ihibitor、AMV Reverse Transcriptase XL组成；

试剂II由Tris-HCL+KCL、灭菌蒸馏水、TaKaRaEXTaq HS组成；

试剂III-a为基因NF-1的PCR引物，试剂III-b为基因ACP-2的PCR引物，试剂III-c为基因CTNN-B1的PCR引物，试剂III-d为基因SOCS-3的PCR引物，试剂III-e为基因β-actin的PCR引物。

上述各试剂的配比如下表1～表4所述。

表1：本发明试剂盒所包含的试剂