[发明专利]一种检测肠病毒的快速检测试纸及其制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测肠病毒的快速检测试纸以及其制造方法，尤其是检测可导致手足口 病的肠病毒EV71和Coxsackievirus A16病毒的快速检测试纸。

背景技术

手足口病(Hand foot mouth disease，HFMD)是全球性传染病，世界大部分地区均有此病流 行的报导，是由肠病毒引起的传染病，多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口 腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。引发 手足口病的肠道病毒有20多种，其中柯萨奇病毒(CoxAsckievirus)A16型(CoxA16)和肠道病 毒71型(Enterovirus71.EV 71)最常见。

澳大利亚和美国、瑞典一样，是最早出现EV 71感染的国家之一。1972～1973年、1986 年和1999年澳大利亚均发生过EV 71流行，重症病人大多伴有中枢神经系统症状(CNS)，一些 病人还有严重的呼吸系统症状。20世纪70年代中期，保加利亚、匈牙利相继暴发以CNS为主 要临床特征的EV 71流行，仅保加利亚就超过750例发病，149人致瘫，44人死亡。英国1994 年4季度暴发了一起遍布英格兰威尔士由Cox A16引起的手足口病流行，监测哨点共观察到952 个病例，为该国有记录以来的最大一次流行，患者大多1～4岁，大部分病人症状平和。该国 1963年以来的流行病资料数据显示，手足口病流行的间隔期为2～3年。其它国家如意大利、 法国、荷兰、西班牙、罗马尼亚、巴西、加拿大、德国也经常发生由各型柯萨奇、埃可病毒 和EV 71引起的手足口病。日本是手足口病发病较多的国家，历史上有过多次大规模流行， 1969～1970年的流行以Cox A16感染为主，1973和1978年的2次流行均为EV 71引起，主要临 床症状为手足口病，病情一般较温和，但同时也观察到伴无菌性脑膜炎的病例。1997～2000 年手足口病在日本再度活跃，EV 71、Cox A16均有分离，EV 71毒株的基因型也与以往不同。 20世纪90年代后期，EV 71开始肆虐东亚地区。1997年马来西亚发生了主要由EV 71引起的手 足口病流行，4～8月共有2628例发病，仅4～6月就有29例病人死亡。死者平均年龄1.5岁， 病程仅2天，100％发热，62％手足皮疹，66％口腔溃疡，28％病症发展迅速，17％肢软瘫， 17例胸片显示肺水肿。

年3月份以来，我国安徽省阜阳市也发生了较大规模的手足口病疫情。截至5月1日，安徽 阜阳累计报告手足口病3321例，其中22例死亡；有978例正在住院治疗，其中重症病例48人， 病危10例；正在接受门诊治疗1209人；已治愈1112人。EV71感染引起重症的比例高于其他类 型肠道病毒，重症患儿病死率较高，目前尚无疫苗和特效治疗药物。因此，能够及时检测出 患者体内携带的EV71病毒和Cox A16病毒，有助于及早发现并控制疫情，对患者及早治疗， 挽救生命。

目前，检测肠道病毒，国内外多采用病毒分离、免疫荧光法、PCR等检测手段。病毒分 离法耗时太长且成本较高；免疫荧光法需要昂贵的荧光显微镜且标本不易保存；PCR方法不 能区别有感染毒力的病毒和死病毒，同时上述方法均需专业人员操作。

正是因为现有检测方法的落后，因此开发出使用方便，检测灵敏，价格低廉的检测产品 是当务之急。

颜色颗粒免疫层析分析为肠病毒的检测提供了一个新的检测途径。免疫微粒技术是利用 高分子材料合成一定粒度大小的固相微粒作为载体，包被上具有特异性亲和力的各种免疫活 性物质(抗原或抗体)，用于免疫学及其他生物学检测与分离的一项技术。作为载体的微粒通 常是以某种高分子有机单体为原料，经过乳液聚合、悬浮聚合及辐照聚合等高分子聚合方法 制备而成。由于制备材料及工艺不同，微粒的种类繁多，现已制成惰性微粒如聚苯乙烯胶乳 微粒、活性微粒如羧化聚苯乙烯微粒、磁性微粒及标记微粒(用同位素、荧光素或酶标记)等 四大类微粒，数量多达几十种。将制备好的微粒与抗原(或抗体)经物理吸附、化学偶联及生 物素亲合素桥联法等致敏方法形成免疫微粒。广泛应用于各种可溶性大分子物质的检测、分 离与纯化、细胞标记与识别等。近年来，微粒技术在核酸分子杂交、DNA与RNA的分离及 PCR等研究领域亦显示出广阔的应用前景。