[发明专利]表皮生长因子培养液、利用培养液治疗糖尿病创伤的外用药及其制备方法

权利要求书

1.一种表皮生长因子培养液，其特征在于：是采用如下方式制成的：在无菌控制操作条件下摘取哺乳动物幼仔下颌腺活体组织，快速称重后剪为碎块，经1640培养液自然沉淀洗涤3次后，置于含有20％FCS的1640营养液的培养瓶中，在37℃，5％CO₂孵箱中培养6-7天；细胞培育过程中，培养液保持清彻，分次收集全部上清液，并于-20℃冷冻保存即可。

2.一种利用培养液治疗糖尿病创伤的外用药，其特征在于：由以下体积份数的原料制成：

表皮生长因子培养液1-2份；3％壳聚糖混悬液1-2份。

3.根据权利要求2所述的利用培养液治疗糖尿病创伤的外用药，其特征在于：所述外用药为涂剂或敷贴剂。

4.一种利用培养液治疗糖尿病创伤的外用药的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)制备表皮生长因子培养液：在无菌控制操作条件下摘取哺乳动物幼仔下颌腺活体组织，快速称重后剪为碎块，经1640培养液自然沉淀洗涤3次后，置于含有20％FCS的1640营养液的培养瓶中，在37℃，5％CO₂孵箱中培养6-7天；细胞培育过程中，培养液保持清彻，分次收集全部上清液，并于-20℃冷冻保存；

(2)制备壳聚糖；

(3)把1-2份体积表皮生长因子培养液和1-2份体积的3％壳聚糖混悬液混合即成成品。

5.根据权利要求4所述的利用培养液治疗糖尿病创伤的外用药的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖的制备步骤如下：

(1)新鲜或陈旧虾壳经挑检剔除杂质后用适量3％HCl浸泡过夜，用自来水漂洗至残液PH6.5-7.0；

(2)加入适量3％NaOH溶液煮沸2小时，弃洗涤液用自来水冲洗虾壳残液至中性；

(3)在碱洗过的虾壳中加入0.2％的高锰酸钾煮沸20分钟，弃高锰酸钾反应液，用自来水冲洗数次；

(4)在高锰酸钾着色的虾壳中加入适量5％草酸溶液，加热至虾壳全部脱色为止，依次分别用自来水和蒸馏水冲洗干净；

(5)将脱色后的虾壳用3-4倍体积的40％NaOH在110℃控温下煮沸反应4-6h，趁热过滤，弃反应液；用自来水冲洗虾壳至中性，再用蒸馏水冲洗数次，在50℃烘干收藏备用。