[发明专利]一种低分子硫酸鼠李聚糖及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种低分子硫酸鼠李聚糖及其制备方法和应用。

背景技术

硫酸鼠李聚糖是由绿藻细胞壁中提取的硫酸多糖，具有多种生物活性，特别是具有显著的抗凝血活性。众所周知，多糖的生物活性与其初级结构、高级结构、分子量、溶解度等有关。其中，分子量具有重要作用，分子量过大，将直接影响其生物活性。因此，通过有效的方法使多糖的分子量降低，是提高多糖生物活性的一种重要手段，也是研制糖类药物的重要途径。硫酸鼠李聚糖的分子量高，粘度大，水溶性差，使其应用受到限制。而且作为一种强聚阴离子性质的硫酸多糖类化合物，硫酸鼠李聚糖的分子量大小及溶解度对其生物活性产生影响。有关低分子硫酸鼠李聚糖未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种低分子硫酸鼠李聚糖及其制备方法和应用，它能弥补现有技术的上述不足。

一种低分子硫酸鼠李聚糖，其特征在于该低分子硫酸鼠李聚糖是由L-鼠李糖基以α-1，3-糖苷键和α-1，2-糖苷键连接的线形分子；α-1，3-糖苷键连接的L-鼠李糖基与α-1，2-糖苷键连接的L-鼠李糖基的摩尔比为1～6∶1；硫酸基位于α-1，3-L-鼠李糖基的C-2位和/或C-4位，和/或位于α-1，2-L-鼠李糖基的C-3位和/或C-4位，低分子硫酸鼠李聚糖中硫酸基的重量百分含量为15～40％；分子量为3000～10000道尔顿。

上述低分子硫酸鼠李聚糖的制备方法，其特征在于将硫酸鼠李聚糖配成水溶胶，加入酸或氧化剂，然后加热反应，冷却，加碱中和或加酶终止反应，分离出清液，然后浓缩，脱盐，将脱盐后的清液浓缩，用超滤膜或用凝胶色谱柱分离，将收集的溶液脱盐，浓缩，干燥，粉碎。

上述低分子硫酸鼠李聚糖在制备抗凝血药物或抗栓药物中的应用。

本发明的产品溶解性好，粘度低，来源于天然的多糖，具有抗凝血活性和抗血栓活性，对人体无毒副作用，可长期使用。还可以通过添加各种附剂制成片剂、散剂、颗粒剂、胶囊等作为预防和治疗血栓栓塞性疾病的新型的抗凝血药物或抗血栓药物。而且，获得的低分子硫酸鼠李聚糖为硫酸鼠李多糖构效关系研究提供了基础化合物。

具体实施方式

下面通过一些具体的实施例来对本发明作进一步的说明。

实施例1

称取干燥的硫酸鼠李聚糖，加水配成重量百分浓度为2％的水溶胶，在搅拌下加入盐酸至水溶胶中的摩尔浓度为0.1mol/L，在60℃下反应180分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加氢氧化钠中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行透析去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过截留分子量10000的超滤膜分离，收集超滤膜外液，用透析法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，冷冻干燥，粉碎即得本发明的低分子硫酸鼠李聚糖。

实施例2

称取干燥的硫酸鼠李聚糖，加水配成重量百分浓度为1％的水溶胶，在搅拌下加入过氧化氢至水溶胶中的重量百分浓度为1.5％，在40℃下反应120分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加入过氧化氢酶去除过氧化氢终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行超滤去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过截留分子量8000的超滤膜分离，收集超滤膜外液，用超滤法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，真空干燥，粉碎即得本发明的低分子硫酸鼠李聚糖。

实施例3

称取干燥的硫酸鼠李聚糖，加水配成重量百分浓度为0.5％的水溶胶，在搅拌下加入硫酸至水溶胶中的摩尔浓度为0.5mol/L，于80℃下反应60分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加碳酸氢钠中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行透析去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过凝胶色谱柱SephacryalS-100分离，用0.2mol/L醋酸钠水溶液洗脱，收集洗脱峰的洗脱液，用透析法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，烘干，粉碎即得本发明的低分子硫酸鼠李聚糖。

实施例4

称取干燥的硫酸鼠李聚糖，加水配成重量百分浓度为3％的水溶胶，在搅拌下加入亚硝酸至水溶胶中的重量百分浓度为1.5％，于30℃下反应200分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加氢氧化钾中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行超滤去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过凝胶色谱柱Sephacryal S-200分离，用0.1mol/L醋酸钠水溶液洗脱，收集洗脱峰的洗脱液，用超滤去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，冷冻干燥，粉碎即得本发明的低分子硫酸鼠李聚糖。