[发明专利]导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法

权利要求书

1.一种导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：用十六烷基三乙基溴化铵法提取摩擦禾或高粱或谷子外源总DNA，在玉米人工授粉并萌发出花粉管后，从花粉管到达胚囊开始到合子第一次分裂为止的时间段内，沿玉米雌穗苞叶顶部处整齐剪去花丝，并以手术刀将中间的花丝割去，使雌穗包叶与花丝形成1个穴状空间，将含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液滴加在穴状空间内，使DNA溶液与花丝的横切面充分接触。

2.根据权利要求1所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：所述的将含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液滴加在穴状空间内的位置是由苞叶与花丝所形成的穴状空间，空间一般直径小于1.5cm。

3.根据权利要求1或2所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：所述的沿玉米雌穗苞叶顶部处整齐剪去花丝是在人工授粉后6-18小时内进行的。

4.根据权利要求1或2所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：将含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液滴加在穴状空间内后，雌穗马上套上硫酸纸袋以防止DNA溶液被风吹干以及挥发。

5.根据权利要求3所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：将含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液滴加在穴状空间内后，雌穗马上套上硫酸纸袋以防止DNA溶液被风吹干以及挥发。

6.根据权利要求1或2或5所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液是溶解于10m mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐与10m mol/L乙二胺四乙酸缓冲液中的DNA溶液，DNA的浓度为100-500μg/ml。

7.根据权利要求3所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液是溶解于10m mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐与10m mol/L乙二胺四乙酸缓冲液中的DNA溶液，DNA的浓度为100-500μg/ml。

8.根据权利要求4所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：含有摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液是溶解于10m mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐与10m mol/L乙二胺四乙酸缓冲液中的DNA溶液，DNA的浓度为100-500μg/ml。

9.根据权利要求1或2或5或7或8所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：外源DNA溶液在穴状空间内重复滴用1次，间隔时间为5-10分钟，所述的剪除花丝与滴加摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液应在充分降雨或灌溉后24小时进行的。

10.根据权利要求3所述的导入外源总DNA培育抗旱玉米自交系的方法，其特征是：外源DNA溶液在穴状空间内重复滴用1次，间隔时间为5-10分钟，所述的剪除花丝与滴加摩擦禾或高粱或谷子总DNA溶液应在充分降雨或灌溉后24小时进行的。