[发明专利]禹白附抗艾滋病的新用途及其有效部位的提取分离方法

权利要求书

1.禹白附作为唯一活性成分在制备抗艾滋病的药物中的用途，其中所述的禹白附为天南星科植物独角莲Typhonium giganteum Engl.的块茎。

2.抗艾滋病的禹白附的有效部位AB、AC、A302和B6的组合，其特征在于是由以下方法制备的：

(1)称取原生药材切成丝状或片状，加入30％乙醇冷浸，在25～30℃下，冷浸24小时，滤去残渣，取冷浸液，离心分离，弃沉淀取上清液，于50～60℃旋转蒸发干燥上清液，得到禹白附30％乙醇提取物干粉；

(2)称取禹白附30％乙醇提取物干粉5g，加200ml水溶解，经柱体积823cm3的大孔吸附树脂HPD450柱层析，用水、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇依次洗脱，洗脱液的体积为柱床体积的3倍，旋转蒸发回收各洗脱液，分别得到水洗脱物干粉AA、30％乙醇洗脱物干粉AB、50％乙醇洗脱物干粉AC、70％乙醇洗脱物干粉AD、95％乙醇洗脱物干粉AE 5种部位，其中AB和AC为有效部位；

(3)称取有效部位AB 300mg，用少量50％甲醇溶解，经柱长95cm、直径2cm的葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20层析，洗脱液为50％甲醇，收集层析样品，流速8滴/分，10ml/流份，共收集10个流份，从第10个流份以后的样品均浓缩合并到第10流份，之后，根据薄层层析进行合瓶，取第2、3、4流份合瓶后的样品150mg再进行柱长45cm、直径2cm的反相C-18填料柱层析，用水、水与甲醇体积比分别为8∶2、6∶4、4∶6、2∶8的甲醇溶液及纯甲醇依次进行洗脱，洗脱液的体积为柱床体积的3倍，收集各洗脱液，旋转蒸发，干燥备用，其中水∶甲醇＝2∶8的洗脱物为有效部位A302；

(4)称取有效部位AC 200mg，用少量50％甲醇溶解，进行柱长95cm、直径2cm的葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20层析，洗脱液为50％甲醇，收集层析样品，流速8滴/分，10ml/流份，共收集10个流份，从第10个流份以后的样品均浓缩合并到第10流份，之后，根据薄层层析进行合瓶，其中第6、7流份合瓶后的样品为有效部位B6。

3.抗艾滋病的禹白附的有效部位AB、AC、A302和B6的组合的提取分离方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)称取原生药材切成丝状或片状，加入30％乙醇冷浸，在25～30℃下，冷浸24小时，滤去残渣，取冷浸液，离心分离，弃沉淀取上清液，于50～60℃旋转蒸发干燥上清液，得到禹白附30％乙醇提取物干粉；

(2)称取禹白附30％乙醇提取物干粉5g，加200ml水溶解，经柱体积823cm³的大孔吸附树脂HPD450柱层析，用水、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇依次洗脱，洗脱液的体积为柱床体积的3倍，旋转蒸发回收各洗脱液，分别得到水洗脱物干粉AA、30％乙醇洗脱物干粉AB、50％乙醇洗脱物干粉AC、70％乙醇洗脱物干粉AD、95％乙醇洗脱物干粉AE 5种部位，其中AB和AC为有效部位；

(3)称取有效部位AB 300mg，用少量50％甲醇溶解，经柱长95cm、直径2cm的葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20层析，洗脱液为50％甲醇，收集层析样品，流速8滴/分，10ml/流份，共收集10个流份，从第10个流份以后的样品均浓缩合并到第10流份，之后，根据薄层层析进行合瓶，取第2、3、4流份合瓶后的样品150mg再进行柱长45cm、直径2cm的反相C-18填料柱层析，用水、水与甲醇体积比分别为8∶2、6∶4、4∶6、2∶8的甲醇溶液及纯甲醇依次进行洗脱，洗脱液的体积为柱床体积的3倍，收集各洗脱液，旋转蒸发，干燥备用，其中水∶甲醇＝2∶8的洗脱物为有效部位A302；

(4)称取有效部位AC 200mg，用少量50％甲醇溶解，进行柱长95cm、直径2cm的葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20层析，洗脱液为50％甲醇，收集层析样品，流速8滴/分，10ml/流份，共收集10个流份，从第10个流份以后的样品均浓缩合并到第10流份，之后，根据薄层层析进行合瓶，其中第6、7流份合瓶后的样品为有效部位B6。

4.根据权利要求2所述的禹白附的有效部位AB、AC、A302和B6的组合在制备抗艾滋病的药物中的用途。